CEQUINOR   05415
CENTRO DE QUIMICA INORGANICA "DR. PEDRO J. AYMONINO"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Evaluación del crecimiento de la línea celular de osteosarcoma humano MG-63 en ratones inmunodeficientes BALB/cN;NIH(s) Fox1
Autor/es:
LEON IE; AYALA M; MASCHI F; CAGLIADA P; VERCELLINI C; LABORDE J; CARRIQUIRIBORDE M; GENTIL F; PRINCIPI G; MILOCCO S; ETCHEVERRY S.B; CARBONE C
Lugar:
Porto Alegre
Reunión:
Congreso; 13 Congreso da Sociedades Brasileira de Ciencias en Animais de Laboratorioe Segundo Evento Latinoamericanode Ciencias en Animais de Laboratorio; 2014
Resumen:
INTRODUCCIÓN Uno de los temas emergentes y de vital importancia dentro de la ciencia de los animales de laboratorio, es el desarrollo de modelos animales capaces de reproducir enfermedades humanas que sirvan para realizar los estudios relacionados a las características, prevención y tratamiento de la misma. En el área de la oncologia desde hace ya mucho tiempo se utilizan ratones para estudiar los procesos de crecimiento tumoral, metástasis y nuevas terapias antitumorales. En relación con esto en el año 1962 se obtuvo un stock de ratones inmunodeficientes N:NIH(S)-nu (nude) que se transformó en una importante herramienta para los estudios oncológicos, ya que se pudieron inocular con tumores procedentes de otras especies, inclusive de origen humano, lo que permitió el estudio in vivo de los mismos (1, 2). El osteosarcoma es definido como una neoplasia agresiva derivada de células mesenquimales que exhiben una diferenciación osteoblástica y generan un osteoide maligno (3). La línea celular MG-63 derivada de un osteosarcoma humano es un excelente modelo para el estudio científico del cáncer de hueso (4). Reportes bibliográficos recientes indican que la línea celular de osteosarcoma humano MG-63 no ha podido ser establecida en ratones nude (5). OBJETIVOS El objetivo principal de este trabajo consistió en generar un modelo animal xenotransplantado con las células tumorales de osteosarcoma humano (MG-63) para su posterior uso en el estudio de la capacidad antitumoral de diversos quimioterapeúticos. METODOS La línea celular MG-63 fue crecida en medio DMEM (dulbecco´s modified eagle medium) con 10% Suero Fetal Bovino en estufa a 37° C y 5 % CO2. Para los ensayos correspondientes se utilizaron ratones machos y hembras (n= 5) de la cepa N:NIH(S) Fox1nu inoculados por vía subcutánea con diferentes cantidades de células tumorales (2x105, 4x105, 1x106 y 2x106 células/animal) para testear cual es la mejor relación de cantidad de células/ crecimiento y desarrollo del tumor. Se realizaron medidas diarias de la forma y tamaño del tumor con un calibre. RESULTADOS Los resultados indican que para el caso de los machos inoculados con 2x105 y 4x105 células/ animal, estos no desarrollaron tumores por un lapso de tiempo de 90 días, por lo cual fueron descartados. A diferencia de estos, aquellos machos inoculados con 1x106 y 2x106 células/animal si desarrollaron tumores de aproximadamente 0,8- 1 cm de diámetro al cabo de 60 días (repique cero). Luego de esto se procedió a repicar el tumor obtenido en estos animales a otros lotes de machos (n= 5) con el fin de estudiar y evaluar el establecimiento del tumor obtenido en la cepa N:NIH(S) Fox1nu. Los resultados obtenidos muestran que el establecimiento de la linea de osteosarcoma humano en los machos N:NIH(S) Fox1nu es posible ya que se realizaron 3 pasajes exitosos en distintos lotes de animales en los cuales crecieron los tumores desarrollando tamaños de alrededor de 1 cm de diámetro. Para el caso de las hembras, los resultados muestran que aquellos animales inoculados con 2x105 y 4x105 células/animal desarrollaron pequeños tumores de 0,5 cm de diámetro luego de 90 días de inoculados. Diferentes son los resultados que se observan en las hembras inoculadas con 1x106 y 2x106 células/animal las cuales en un lapso de 45 días reportaron tumores mayores a 1 cm de diámetro. CONCLUSIONES El crecimiento de la línea celular de osteosarcoma humano MG-63 en ratones inmunodeficientes N:NIH(S) Fox1nu fue positivo tanto en machos como en hembras, observándose que en estas ultimas el crecimiento fue mucho mas rápido. Se logró establecer un modelo murino xenotransplantado con las células para el estudio y el desarrollo del osteosarcoma. REFERENCIAS 1.Dooley TP, Stamp-Cole M and Ouding R. Evaluation of a Nude Mouse Tumor Model Using β-Galactosidaseexpressing Melanoma Cells. Lab Anim Sci 1993; 43 (1): 48-57. 2.Carbone C, Maschi F. El ratón nude (nu/nu) como modelo animal de inmunodeficiencia. Revista QuímicaViva 2006; Número 1, Año 5. 3. Ottaviani G, Jaffe N (2009). The epidemiology of osteosarcoma. In: Jaffe N. et al. "Pediatric and Adolescent Osteosarcoma Springer New York 4.Mohseny AB, Pancras CW, Hogendoorn CW, Cleton-Jansen AM (2012) Sarcoma doi:10.1155/2012/417271 5. Mohseny AB, Machado I, Yongping Cai Y Schaefer K, Serra M, Pancras CW Hogendoorn1, Llombart-Bosch A, Cleton-Jansen A.M, Laboratory Investigation (2011) 91, 1195?1205.
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