Simulando las bromoperoxidasas. Trabajo práctico de laboratorio para alumnos de Química Inorgánica con aplicación a la Bioinorgánica

M. SOLEDAD ISLAS, LUCIANA G. NASO, PATRICIA A.M. WILLIAMS, EVELINA G. FERRER

Catamarca

Congreso; Segundo Congreso Internacional de Educación en Ciencia y Tecnología; 2011

En este trabajo práctico se plantean como objetivos la preparación y caracterización de un peroxocomplejo de vanadio (V) con el ácido cítrico como modelo del sitio activo de la bromoperoxidasa, posteriormente de busca generar in vitro de condiciones similares en las cuales se produce esta reacción enzimática. Para realizar el TP se procede a la síntesis del mismo en base a referencias previas. Esta etapa permite el manejo de técnicas de síntesis típicas para complejos de coordinación. Una vez obtenido y purificado se procede a la caracterización del complejo por medio de las técnicas de Infrarrojo y espectroscopía UV-visible. En esta fase del TP se permite a los alumnos habituarse a la utilización de equipamiento de alta tecnología, preparación de las muestras por diferentes procedimientos y análisis de los resultados por comparación haciendo uso de conceptos previamente adquiridos durante el curso. Una simulación in vitro se fundamenta en un proceso de bromación de un sustrato orgánico en presencia del peroxocomplejo de vanadio como catalizador. La metodología consiste en la bromación de rojo fenol a pH=5,8 como sustrato orgánico. La mezcla de reacción contiene buffer fosfato (50ml, pH=5,8), KBr (2M), rojo fenol (20mM) y complejo de vanadio (0,5M). La reacción se sigue con la aparición de la banda a 592 nm característica del producto resultante de la bromación. Como resultado se espera que los alumnos puedan realizar una apreciación cualitativa y cuantitativa de la actividad símil bromoperoxidasa demostrada vía el espectro electrónico obtenido, puedan comparar con datos de la bibliografía, estimar del error y localización de las posible fuentes del mismo.