Evaluación de distintos niveles de progesterona por métodos inmunoquímicos que utilizan detección espectroscópica o electroquímica

SEVERINO F., BELLUZO M.S. LAGIER C.M., Y RIBONE M.E.

Bahía Blanca, Argentina

Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica; 2009

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

EVALUACIÓN DE DISTINTOS NIVELES DE PROGESTERONA POR MÉTODOS INMUNOQUÍMICOS QUE UTILIZAN DETECCIÓN ESPECTROSCÓPICA O ELECTROQUÍMICAFlorencia Severino, María S. Belluzo, Claudia M.Lagier y María É. RiboneDepartamento de Química Analítica. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR. IQUIR-CONICET. Suipacha 570, Rosario (2000).La producción bovina en nuestro país constituye un importante recurso económico. No obstante, los rendimientos podrían ser mejorados si fuera posible incrementar la tasa de reproducción animal.1 Un modo de conseguir esto es mediante la inseminación en el momento del estro y la detección temprana de la ingravidez, en caso de inseminación fallida, para poder entonces repetir el procedimiento a la brevedad posible.2 Para ello, es preciso contar con métodos confiables que permitan evaluar los niveles de progesterona, hormona indicativa del estado del animal.Si bien es posible adquirir en el mercado extranjero kits de ELISA convencionales para la determinación de progesterona en fluidos vacunos, éstos poseen costos prohibitivos para el productor ganadero local. Por lo tanto, resulta de interés el desarrollo de un método para evaluar los niveles de progesterona que permitan la detección tanto del estro como de la preñez en ganado bovino.En los últimos años se ha avanzado en el estudio de nuevas metodologías para el análisis inmunoquímico con detección elecctroquímica que permiten identificar analitos indicativos de situaciones fisiológicas o patológicas de utilidad diagnóstica en muestras biológicas.3 Más aún, ya se ha presentado una estrategia en la que se propone la detección de la hormona utilizando electrodos estampados serigráficamente (SPE).4 Sin embargo, las limitaciones en la reproducibilidad y sensibilidad reportadas cuando se utilizan SPE, han impedido el desarrollo de equipos comerciales.En este trabajo se informa acerca de los resultados obtenidos durante el desarrollo de inmunoensayos que permiten evaluar progesterona. En primer término, se efectuaron inmunoanálisis competitivos sobre placas de ELISA sensibilizadas con anticuerpos monoclonales, habiendo utilizado la detección espectrofotométrica convencional. Se establecieron las condiciones óptimas de trabajo, realizándose la curva de titulación tanto del anticuerpo como del antígeno marcado. En una segunda etapa, se estudió la factibilidad de evaluar electroquímicamente el nivel de progesterona en muestras de leche artificialmente adicionadas de la hormona. Para ello, se ensamblaron inmunoelectrodos sobre distintos soportes y se evaluaron sus respuestas.Referencias: [1] http://www.sagpya.mecon.gov.ar/new/0-0/prensa/publicaciones/ganaderia/GANARGEN/POSIBI.HTM[2] Fertig M., Luchetti D. Bovinos: Manejo nutricional y condición corporal de la vaca de cría. Carpeta Técnica, Ganadería Nº 17, Octubre 2005. EEA INTA[3] Belluzo M.S., Ribone M.E., Lagier C.M. Sensor. 8 (2008) 1366. [4] Pemberton R.M., Hart J.P., Mortan T.T.Biosen. Bioelectron. 16 (2001) 715.