FORMULACIÓN DE MICROPARTÍCULAS DE PRAZIQUANTEL. ENSAYOS IN VITRO SOBRE ECHINOCOCCUS MULTILOCULARIS

EVA CAROLINA ARRUA; CLAUDIO JAVIER SALOMON; ANDREW HEMPHILL; BRITTA LUNDSTROM

Santiago

Congreso; FLAP XXIV - Congreso Latinoamericano de Parasitología; 2017

Echinococcus multilocularis se distribuye ampliamente en el hemisferio norte y es endémico en Europa central y diversas regiones de América del Norte y Asia. Se considera que la prevalencia del parásito está aumentando y se está extendiendo a nuevos países. En este sentido, el praziquantel (PZQ) ha demostrado ser eficaz contra E. multilocularis. El objetivo de este trabajo fue formular micropartículas (MPs) de PZQ y estudiar su eficacia frente al parásito E. multilocularis. Para ello se llevaron a cabo los siguientes métodos: Formulación de MP. Se pesaron 3g de PZQ y se disolvieron en 75ml de etanol, esto incorporó en 200ml de una solución acuosa que contenía 6g de PVA o 6g de poloxamero P407. Se sometió a agitación magnética durante 60 minutos. Se agregaron 200ml de una solución 2%p/v de Sipernat®50, y luego se procedió al secado por atomización empleando un Mini Spray Dryer B290. Determinación del rendimiento. Se pesaron exactamente los sólidos obtenidos en cada caso y se determinó el rendimiento en masa como cociente entre esa cantidad y el total de todos los sólidos empleados. Cálculo de eficiencia de entrampado. Se pesaron cantidades exactas de cada una de las muestras y se disolvió completamente en agua: etanol (1:1). Mediante medidas de absorbancia (263nm) se determinó la cantidad de PZQ en las MPs. Ensayos in vitro de MPs contra metacestodos de E. multilocularis (PGI). La preparación de metacestodos de E. multilocularis se llevó a cabo a partir de ratones BALB/c infectados intraperitonealmente. Se llevo a cabo el ensayo midiendo la liberación de la enzima fosfoglucosa isomerasa sobre el deterioro físico de los metacestodos. Evaluación de la viabilidad del metacestodo mediante el ensayo ?alamarBlue?. La configuración general de las vesículas y los fármacos fue la misma que para el ensayo de PGI. Lugo de 12 días de cultivo en presencia de las muestras, los metacestodos se rompieron mecánicamente, se añadió y se mezcló bien con los metacestodos rotos. La fluorescencia se midió luego de 0 y 5 h de incubación. El experimento se realizó por triplicado. Se obtuvieron MPs de PZQ con rendimientos del 70%. La cantidad de PZQ entrampado fue de 60% para MPs PZQ-PVA y 55% para MPs PZQ-P407. A diferencia del PZQ puro, que fue inactivo, MPs de PZQ-P407 presentan actividad luego de 12 días, mientras que MPs de PZQ-PVA muestran mayor actividad. Por otro lado la viabilidad de metacestodos después de 12 días de incubación con MPs de PZQ-PVA se observa claramente disminuida, lo que no sucede con PZQ puro.