IQUIR   05412
INSTITUTO DE QUIMICA ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Formulación de nanopartículas de glibenclamida usando diseño experimental.
Autor/es:
CLAUDIO JAVIER SALOMON; EVA CAROLINA ARRUA
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; XIII Jornadas de Farmacia y Bioquímica Industrial; 2017
Resumen:
FORMULACIÓN DE NANOPARTÍCULAS DE GLIBENCLAMIDA USANDO DISEÑO EXPERIMENTALEva C Arrua, Claudio J SalomonInstituto de Química de Rosario. Área Tecnología Farmacéutica.arrua@iquir-conicet.gov.ar; 341-4370477 (Interno 120)INTRODUCCIÓNLa glibenclamida (GB) es un fármaco con muy baja solubilidad que se ubica en el tipo II del Sistema de Clasificación Biofarmacéutico. Se ha estudiado como mejorar su biodisponibilidad por disminución del tamaño de partícula con diferentes sistemas, sin embargo, las condiciones para la elaboración de los mismos son diversas e influyen significativamente en los resultados finales, por lo que el número de pruebas necesarias para un estudio completo es muy grande. En este sentido, el diseño de experimentos en una herramienta estadística que permite determinar las condiciones ideales (u óptimas) para elaborar un producto, proceso o servicio que cumpla con las expectativas usando el mínimo número de experimentos o pruebas. El objetivo de este trabajo fue determinar las condiciones ideales para la elaboración de nanopartículas (NPs) de GB empleando diseño de experimentos.MATERIALES Y MÉTODOSMateriales. GB fue suministrada por el Laboratorio Proagro (Rosario, Argentina). Eudragit RLPO, polietilenglicol (PEG) 6000, poloxameros (P-188 y P-407) y todos los solventes empleados fueron de grado analítico.Elaboración de NP, determinación de la eficiencia de entrampado y del rendimiento. Las NP fueron preparadas por un proceso de nanoprecipitación con posterior secado en liofilizador. Se disolvió el fármaco en la fase orgánica (etanol: acetona en relación 1:2) conteniendo Eudragit (de 0 a 200 mg totales), y fue incorporado por un sistema de goteo lento sobre una fase acuosa compuesta por los poloxameros (de 0 a 400 mg) y PEG (de 0 a 200 mg) en agua destilada previamente filtrada. La suspensión formada se mantuvo durante 60 minutos en agitación magnética o en ultrahomogeneizador (Ultraturrax), y luego se evaporó el solvente orgánico por agitación magnética durante toda la noche bajo campana. El sistema fue centrifugado a 15000 rpm. El sobrenadante se empleó para determinar la eficiencia de entrampado del fármaco y el precipitado fue liofilizado para obtener las NPs. El rendimiento fue calculado como la relación entre el peso del producto obtenido experimentalmente y la suma de los pesos de todos los componentes de partida.Determinación del tamaño de partícula. Se realizaron experimentos de dispersión de luz dinámica, utilizando un ?Nano Particle Analyzer SZ-100?.Determinación de la solubilidad acuosa. Aproximadamente 100 mg de cada una de las muestras ensayadas se colocó en frascos con 5 ml de agua destilada. Se mantuvo en agitación orbital a 150 rpm por 72 horas. El contenido de los frascos fue centrifugado para separar las partículas no disueltas de la solución. La cantidad de GB se determinó por absorbancia a 300 nm.Ensayos de disolución. 20 mg de GB (o la cantidad de muestra los contuviera) se colocaron en el medio formado por 500 ml de buffer fosfato pH 7,5, se mantuvo en agitación a 50 rpm por el método de paletas a 37 ºC. A tiempos fijos se tomaron alícuotas (por triplicado) que fueron previamente filtradas y la cantidad de GB fue determinada por absorbancia a 230 nm.RESULTADOSLos resultados obtenidos en la fase de screening demostraron que el modelo fue significativo en las 4 respuestas ensayadas. Para la fase de optimización se llevó a cabo un diseño de superficie de respuesta central compuesto estudiando todas las respuestas mencionadas. El programa muestra los experimentos necesarios para estudiar diferentes combinaciones de los factores seleccionados.Los resultados de los ensayos ANOVA para la optimización de las respuestas arrojan buenos indicadores estadísticos, la falta de ajuste en todos los casos es no significativa, siendo el modelo significativo y el R2 ajustado similar al R2 predicho (ver en tabla a continuación).A partir de esto se buscó formular un sistema nanoparticulado de GB con un elevado rendimiento, alta eficiencia de entrampado, tamaño de partícula bajo y aumentar al máximo la solubilidad acuosa aparente de GB. Con toda esta información el programa muestra las condiciones ideales para la elaboración de las NPs (la de mayor deseabilidad D=0,83). Los resultados obtenidos experimentalmente fueron similares a los teóricos predichos por el programa.Por otro lado se comprobó que velocidad de disolución de GB en este sistema fue significativamente superior a la de GB sin tratar (a continuación se muestran los perfiles de disolución).CONCLUSIONESLas respuestas seleccionadas para su optimización mostraron ser buenos indicadores del comportamiento de los sistemas respecto a la disolución de GB, las NPs de GB optimizadas fueron las que resultaron con el mejor perfil de disolución.El diseño de experimentos demostró ser una herramienta eficaz para predecir los resultados durante el proceso de elaboración de NPs.