Caracterización de una nueva Baeyer-Villiger monooxigenasa de origen bacteriano

CECCOLI, ROMINA D.; RIAL, DANIELA V.; BIANCHI, DARIO A.

Montevideo

Congreso; II Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones (SiLaBB II) - VII Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones (EnReBB VII); 2016

Las Baeyer-Villigermonooxigenasas (BVMOs) tipo I son flavoenzimas dependientes de FAD que utilizanNADPH para catalizar la inserción de un átomo de oxígeno próximo a un grupocarbonilo del sustrato, a partir de oxígeno molecular. Estas enzimas son degran interés tanto en el ámbito académico como el industrial ya que mediante labiooxidación de cetonas permiten obtener ésteres o lactonas de forma selectiva,eficiente y ambientalmente amigable. Estos productos poseen mucho valor comointermediarios para la síntesis de compuestos con actividad biológica, productosnaturales y análogos [1-4].       El objetivo de nuestro trabajo es identificar y caracterizar nuevas BVMOs quepuedan ser utilizadas como biocatalizadores para aplicaciones en síntesisquímica. Nuestro grupo ha identificado por homología de secuencias seisposibles genes candidatos en el genoma de la bacteria Bradyrhizobium japonicum, y hemos avanzado en el estudio de algunasde estas posibles BVMOs. En este trabajo presentaremos el clonado de un gen de B. japonicum que hemos denominado bj05. El mismo fue expresado en formarecombinante en células de EscherichiacoliBL21(DE3) y, mediante electroforesis en condiciones desnaturalizantes,hemos detectado la presencia de una proteína soluble del tamaño esperado.Además, hemos evaluado su perfil de aceptación de sustratos mediante ensayos debiotransformación en células enteras. Este nuevo biocatalizador del tipo BVMOfue capaz de oxidar varias cetonas entre ellas algunas cetonas alifáticaslineales, fenilacetona y (±)-cis-biciclo[3.2.0]hept-2-en-6-ona.Este trabajo fue financiado por CONICET, ANPCyT y UNR.Los autores son miembros de la Carrera del Investigador Científico yTecnológico de CONICET, Argentina.[1] Ceccoli, R.D.;Bianchi, D.A.; Rial, D.V. FrontiersMicrobiol. 2014, 5, 25. [2] Mihovilovic,M.D.; Bianchi, D.A.; Rudroff, F. Chem. Comm.2006, 630, 3214. [3] Bianchi, D.A.; Moran-Ramallal, R.; Iqbal, N. et al. Bioorg. Med. Chem. Lett.2013, 23, 2718. [4] Rudroff, F.; Bianchi, D.A.;Moran-Ramallal, R.et al. Tetrahedron2015 en prensa.