Modelos experimentales de inmunoensayos de flujo lateral basados en diseños alternativos: 1. Lectura sin instrumentos

PUJATO, N.; VANASCO, B.; LAGIER, C. M.; MARCIPAR, I. S.; BERLI, C. L.

Santa Fe

Simposio; II Reunión de Microfluídica Argentina; 2015

Los inmunoensayos de flujo lateral (IFL) representanun grupo de dispositivos portables y autónomos para la detección rápida ysencilla de diversos indicadores bioquímicos de agentes patógenos yenfermedades. Además de las aplicaciones en salud, el uso de los IFL seextiende al control ambiental, fitosanitario y bromatológico, entre otroscampos. Actualmente nos encontramos en una etapa de renacimiento de estatecnología debido a varios factores: su capacidad para brindar solucionesanalíticas de gran impacto social, la reciente caducidad de la mayoría de laspatentes relacionadas, y el notable conocimiento que está siendo generado día adía en el campo de la microfluídica basada en papel. El desarrollo yoptimización de nuevos dispositivos de IFL implica importantes esfuerzosexperimentales dado la necesidad de explorar diseños, caracterizar losmateriales utilizados como sustrato, controlar los parámetros cinéticos,mejorar la sensibilidad de detección, y finalmente la integración de estosaspectos para lograr un mejor rendimiento general del dispositivo. En particular, en este trabajo se explora un modelo dedetección a ojo desnudo, que ofrece la posibilidad de desarrollarlo empleandocomponentes disponibles en Argentina. El dispositivo se diseñó para ladetección de anticuerpos en muestras de suero humano.  Las tiras reactivas se prepararon empleandouna única membrana como matriz de ensayo, sobre la cual se inmovilizaronantígenos bacterianos (línea de ensayo) y anti-anticuerpos específicos parainmunoglobulinas humanas (línea control). El IFL propiamente dicho, consistióen marcar con enzimas los anticuerpos presentes en la muestra, luego ponerlosen contacto con las tiras reactivas previamente preparadas y finalmente revelarel ensayo adicionando el sustrato cromogénico de  la enzima. El modelo de IFL propuesto,permitió detectar eficientemente los anticuerpos específicos presentes en lasmuestras de suero, a partir de la simple visualización de líneas de color enlas tiras reactivas (Figura 1). Estos resultados, sugieren que es posible eldesarrollo de nuevos dispositivos de IFL, que empleen materiales y reactivosaccesibles en nuestro país y que, por lo tanto resulten más económicos. Sinembargo, se debe continuar trabajando en la optimización y caracterización deestos formatos alternativos, así como también en la minimización de las etapasde ensayo y eventualmente en el diseño de dispositivos semi-cuantitativos.