Cromatografía líquida de alta eficiencia con detección dual UV-fluorescente acoplada a calibración multivariada para la determinación de hormonas sexuales en muestras ambientales

R. PÉREZ, G. ESCANDAR

La Plata

Congreso; VIII Congreso Argentino de Química Analítica; 2015

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

Las hormonas sexuales, tanto naturales como sintéticas, se introducen al ambiente a través dediversas fuentes siendo una de las más importantes las aguas residuales domésticas [1]. Estoscompuestos, reconocidos como disruptores endócrinos, interfieren con el sistema endócrino de los organismos vivos produciendo efectos adversos tales como problemas reproductivos, neurológicos e incluso cáncer. Como parte de un proyecto dedicado al desarrollo de métodos compatibles con los principios de la química analítica verde [2], se desarrolló una estrategia innovadora que involucró datos de segundo orden obtenidos por medio de cromatografía líquida en modo isocrático con detección dual (absorbancia y fluorescencia) para la determinación simultánea de once hormonas sexuales: siete estrógenos naturales y sintéticos (estradiol, estriol, etinilestradiol, estrona, hexestrol y dietiestilbestrol), tres progestágenos (norestisterona, levonorgestrel y progesterona) y un andrógeno (androstenediona) en diferentes muestras de aguas y sedimentos. De esta manera, la cromatografía permitió la resolución total o parcial de las bandascromatográficas de un gran número de compuestos, la doble detección posibilitó la selección de laseñal apropiada para cada analito, y la calibración de segundo orden facilitó la resoluciónmatemática de bandas cromatográficas parcial o totalmente solapadas, así como la cuantificación de los analitos en presencia de interferentes (ventaja de segundo orden). Como resultado, se logró una marcada disminución en el consumo de solventes orgánicos tanto en los procedimientos de limpieza y extracción como en la separación cromatográfica, acortando los tiempos de elución y empleando únicamente un procedimiento sencillo de extracción en fase sólida (EFS) en membranas de C18.El algoritmo quimiométrico de segundo orden utilizado para procesar los datos (MCR-ALS,resolución multivariada de curvas acoplada a cuadrados mínimos alternantes), permitió lograr unaexcelente selectividad a través de la determinación de los analitos en muestras complejas tales como aguas naturales y sedimentos. Se obtuvieron límites de detección (LODs) entre 6 y 24 ng L-1 para las muestras de aguas y entre 0.1 y 0.9 ng g-1 en sedimentos.