Calibración multivariada de cuatro vías utilizando cromatografía líquida de alto rendimiento ultra-rápida con detección fluorescente. Aplicación al análisis directo de clorofilas a y b y feofitinas a y b en aceites de oliva

LOZANO, V. A.; MUÑOZ DE LA PEÑA, A.; DURÁN-MERÁS, I.; ESPINOSA MANSILLA, A.; ESCANDAR, G. M.

Mendoza

Congreso; VII Congreso Argentino de Química Analítica; 2013

Por primera vez se describe un método de calibración multivariada de cuatro vías utilizando datos cromatográficos. Dichos datos se obtuvieron usando cromatografía líquida de ultra alta eficiencia, usualmente conocida como UHPLC por las siglas en inglés de ultra high performance liquid chromatography, en combinación con un detector espectrofluorimétrico de barrido rápido. El método desarrollado se aplicó a la determinación directa de clorofilas a y b y feofitinas a y b en muestras de aceites de oliva. La composición del contenido total de clorofilas y feofitinas, naturalmente presentes en el aceite, es un parámetro de calidad correlacionado con el color, que es un atributo básico para evaluar la calidad del aceite de oliva. Las matrices de tres vías de emisión-tiempo de elución (METs) para cada muestra se obtuvieron experimentalmente midiendo el espectro de emisión completo a lo largo del cromatograma. La cuarta vía se obtuvo mediante el registro de cada MET a ocho longitudes de onda de excitación diferentes. Las ocho METs así obtenidas se unieron en una sola matriz de cuatro vías, que fue posteriormente analizada con diferentes algoritmos quimiométricos tales como: análisis paralelo de factores (PARAFAC), cuadrados mínimos parciales desdoblados acoplados a la trilinealización residual (U-PLS/RTL) y cuadrados mínimos parciales multidimensionales acoplados a la trilinealización residual (N-PLS/RTL). Se calcularon las cifras de mérito para los datos de la calibración multivariada aplicando los tres algoritmos, y los mejores resultados se obtuvieron tanto con U-PLS/RTL como con NPLS/RTL. Finalmente, el método desarrollado se aplicó a la determinación de clorofilas a y b y feofitinas a y b en cuatro muestras de aceites de oliva. Se llevó a cabo un estudio de recuperación adicionando las muestras con los cuatro pigmentos a tres niveles de concentración. Los resultados de predicción obtenidos fueron satisfactorios (entre 85 y 106 % de recuperación) considerando la complejidad de los aceites de oliva analizados y la ausencia de separaciones y tratamientos previos en el análisis.