DESARROLLO DE UN MÉTODO ESPECTROFOTOMÉTRICO SENCILLO PARA CUANTIFICAR GLICEROL EN MATRICES COMPLEJAS

FACCENDINI, P. L.; COSTA, J. G.; RIBONE, M. E.; MARCIPAR, I. S.; LAGIER, C. M.

Santa Fe

Congreso; VI Congreso Argentino de Química Analítica; 2011

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

El glicerol es utilizado en variados procesos e industrias tales como la alimenticia, farmacéutica, textil y automotriz, entre otras.[1] Cuantificarlo en matrices diversas es una práctica corriente, aunque los métodos convencionales son generalmente laboriosos, requieren prolongados tiempos de análisis y suelen ser costosos [2]. Muchos de ellos involucran pasos separativos y extractivos con solventes orgánicos, o utilizan oxidantes fuertes que pueden reaccionar con una variedad de alcoholes. De este modo, la utilidad del método queda limitada a muestras simples, porque las muestras complejas pueden presentar interferencias o incompatibilidades por la presencia potencial de diversos alcoholes. Se han ensayado alternativas como la cromatografía líquida de alta resolución, pero se consumen considerables cantidades de solventes costosos, tales como acetonitrilo y no se disminuyen los tiempos finales de análisis.[3] Para el caso de matrices complejas, pueden emplearse kits comerciales que utilizan la enzima Gliceroldeshidrogenada, GlDH, evaluándose la cantidad de NADH producido por reducción del cofactor de la enzima, siguiéndose el incremento de absorbancia a 340 nm.[4] Si bien con esta metodología se pueden minimizar los pasos previos, se consumen elevadas cantidades de NAD+, reactivo altamente costoso. Por lo arriba expuesto, es deseable encontrar alternativas para la cuantificación de glicerol que sean simples, de corto tiempo de análisis, que eviten el tratamiento previo de la muestra y sean de bajo costo operativo. En este trabajo, desarrollamos una técnica que utiliza GlDH para cuantificar glicerol en matrices complejas. Utilizando una enzima comercial y reactivos generales, logramos establecer un protocolo de trabajo para cuantificar el analito. El método cosiste en evaluar espectrofotométricamente el ion ferricianuro, que es consumido al regenerar el cofactor NAD+. Los resultados obtenidos se correlacionaron apropiadamente con aquellos obtenidos con otros métodos de vigencia actual y demostró ser suficientemente económico como para competir con otras alternativas comerciales. [1] da Silva, G.; Mack, M.; Contiero, J. Biotech. Adv. 27 (2009) 30?39. [2] American Society For Testing And Materials (ASTM), D 1615 ? 60 (1995). [3] López, E.; Nardini, L.; Rouge, P.; Feltrinelli M.; Santos, L.; Hardmeier, I.;  Lagomarsino, A. 4tas. Jornadas Desarrollo e Innovación INTI (2002) [4] Gamella, M.; Campuzano, S.; Reviejo, A.; Pingarrón, J. Anal. Chim. Acta 609 (2008) 201?209.