Efecto de la Terapia Fotodinámica con extractos vegetales en la susceptibilidad a Fluconazol de Candida albicans

SORTINO MAXIMILIANO; POSTIGO AGUSTINA; ZACCHINO SUSANA

Tucuman

Congreso; III Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos; 2016

IntroducciónLa Terapia Fotodinámica Antimicrobiana (TFA) es una alternativa terapéutica para el tratamiento de micosis que utiliza moléculas fotosensibilizadoras (FS) y luz para producir especies reactivas de oxígeno (EROs) que destruyen patógenos microbianos, que producen un estrés oxidativo que lleva a la muerte celular.1 Las células tratadas con TFA pueden responder a los daños producidos por las EROs mediante distintas respuestas de rescate o adaptativas, que generalmente implican cambios en la expresión de genes y proteínas.2 Por lo tanto, el pre-tratamiento de levaduras con una concentración sub-inhibitoria de un FS podría disminuir la susceptibilidad de levaduras a antifúngicos comerciales.3 Por ésto, la TFA es un método potencialmente atractivo para el tratamiento de infecciones fúngicas en combinación con antifúngicos convencionales.4 En trabajos anteriores se demostró que el extracto hexánico de Porophyllum obscurum (PoHex) en presencia de luz UV-A inhibió el crecimiento de Candida albicans. A partir de este extracto se aisló el compuesto fotoactivo mayoritario, identificado como 2,2?:5?2?-tertiofeno (α-T).ObjetivosEl objetivo de este trabajo fue evaluar la susceptibilidad de C. albicans a Fluconazol (FCZ) luego de la exposición a PoHex o α-T y luz UV-A.Materiales y métodosEl ensayo se realizó en microplacas de 96 pocillos siguiendo los lineamientos del documento M27-A3.5 El ensayo se diagramó en un esquema similar al de tablero de ajedrez,6 donde en primer lugar se realizaron diluciones seriadas al medio de PoHex o α-T, luego se les agregó el inóculo de C. albicans y se irradiaron con luz UV-A el tiempo óptimo previamente establecido (5 min para α-T y 60 min para PoHex). Luego a estas mismas microplacas se les agregaron diluciones seriadas al medio de FCZ (concentración final: 64 - 0,06 µg/mL) y por último, se incubaron 24 h a 28 ºC. Los resultados se expresaron en porcentaje de inhibición y se graficaron en función de la concentración del FCZ, para cada concentración de PoHex o α-T.ResultadosAl enfrentar a C. albicans a FCZ sin exposición previa a los FS, se obtuvo una CIM80 de 4˚µg/mL. No se observaron cambios en CIM80 del FCZ al tratar a la levadura sólo con luz o PoHex o α-T sin irradiación. El tratamiento previo de C. albicans con α-T e irradiación no produjo cambios su susceptibilidad a FCZ. La exposición de la levadura PoHex a una concentración de sub-inhibitoria (CIM/2 = 0,49 µg/mL) y luz UV-A produjo una disminución de la CIM80 del FCZ de 4 a 0,25 µg/mL. ConclusionesEl extracto PoHex es promisorio para el tratamiento de candiadiasis mediante la utilización de TFA combinada con FCZ, debido a que permite reducir las dosis empleadas, lo que lograría una reducción de los efectos adversos de la droga comercial y evitaría la selección de cepas resistentes.