CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

Las plantas se encuentran naturalmente expuestas a la radiación UV-B, la cual puede inducir lesiones mutagénicas en el ADN. En polen de maíz, se ha observado que la exposición a UV-B puede reactivar transposones de la familia Mutator. El sistema Mutator incluye diferentes clases de elementos Mu, los cuales possen en sus extremos repeticiones terminales invertidas (TIR). MuDR es el elemento regulatorio y codifica para los genes murA y murB. MurA es la transposasa y MurB una proteína de función desconocida. En arabidopsis existen homólogos a los elementos Mu llamados MULE. Se ha observado que los elementos Mu silenciados se encuentran metilados en residuos de citosina y asociados a histonas metiladas. El objetivo de este trabajo es determinar si la radiación UV-B reactiva los elementos Mu y si esa activación se asocia a cambios en la cromatina. Mediante RT-PCR en tiempo real se observó que los transcriptos de murA aumentan en hojas de maíz y Arabidopsis tratadas con UV-B. Por otro lado, estudios de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP) revelaron que el UV-B modifica el grado de metilación y acetilación de la histona H3 (H3K9me2 y H3Ac) asociadas a las regiones TIR. Paralelamente, empleamos la técnica de Southern blot y PCR en tiempo real para analizar si el UV-B altera el nivel de metilación en las secuencias de las TIR. Se utilizaron la línea salvaje de maíz B73, cuyos transposones están totalmente silenciados, y líneas que poseen los transposones Mu activos y parcialmente silenciados. Para arabidopsis se utilizó la línea salvaje Col0 y una línea mutante ddm1 que presenta el ADN hipometilado. Los resultados obtenidos mediante PCR en tiempo real muestran que la metilación en el ADN en transposones silenciados disminuye luego de la exposición con UV-B. En conclusión, las modificaciones en la cromatina causadas por la radiación UV-B derivan en la activación de transposones, ampliando así su efecto mutagénico.