“Estudio del Proteoma nuclear en hojas de maíz luego de exposición bajo radiación UV-B”.

MABEL CAMPI; VIRGINIA WALBOT; AL BURLINGAME; PAULA CASATI

Chascomús, Buenos Aires

Congreso; XXVI Reunión Nacional de Fisiología Vegetal; 2006

La disminución de la capa de ozono estratosférica ha aumentado los niveles de radiación UV-B en la superficie terrestre, siendo las plantas particularmente sensibles a los efectos deletéreos causados por este tipo de radiación. Estudios previos de proteómica han demostrado que en hojas de maíz, los patrones proteicos son modificados por la radiación UV-B. En este trabajo estudiamos los cambios que se producen en el proteoma nuclear de líneas de maíz con distinta susceptibilidad a la radiación UV-B, incluyendo plantas trasgénicas con disminución en la expresión de diversas proteínas remodeladoras de la cromatina (chc101, nfc102, mbd101, y sdg102), que muestran alta susceptibilidad a la radiación UV-B. Para ello se purificaron núcleos de hojas de maíz tratadas bajo 8 hs con UV-B y en condiciones control sin UV-B en invernadero; y las proteínas aisladas de esta forma se separaron por electroforesis bidimensional utilizando la técnica DIGE, que permite separar en un mismo gel dos muestras a comparar mediante el marcado covalente de cada muestra proteica con dos reactivos fluorescentes diferentes. Los patrones proteicos han sido analizados utilizando el software ImageMaster 2D Platinum, y encontramos que 112 proteínas muestran cambios inducidos por UV-B en al menos una de las líneas en estudio. La identificación por espectrometría de masa identificó diversas proteínas de la cromatina, entre ellas histonas; múltiples isoformas han sido confirmadas para algunas proteínas. Cambios en las modificaciones covalentes en las proteínas identificadas están siendo evaluadas por los estudios de los espectros de masa y por Western blot. El presente trabajo permitirá identificar cambios que ocurren a nivel de expresión y/o modificación postraduccional regulada por UV-B en proteínas nucleares de maíz.