INTEC   05402
INSTITUTO DE DESARROLLO TECNOLOGICO PARA LA INDUSTRIA QUIMICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Biodegradación in vitro de mezclas de hidrocarburos utilizando consorcios microbianos definidos
Autor/es:
MAMMARELLA, ENRIQUE J.; GALLO, MARIANO; SUPPO, CANDELA L.; MANZO, RICARDO M.
Lugar:
Florencio Varela
Reunión:
Congreso; IV Congreso Nacional de Ciencia y Tecnología Ambiental; 2019
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Ciencia y Tecnología Ambiental
Resumen:
En la actualidad, existe un alto porcentaje de suelosproductivos que han sido contaminados por acción antropogénica, por medio de derrames o pérdidas de hidrocarburos del petróleo. Esta problemática se encuentra en constante crecimiento, por lo que es de relevancia desarrollar procesos capaces de recuperar las áreas impactadas. Entre ellos, se destacan los sistemas de biorremediación, ya que estos emplean microorganismos que pueden degradar o transformar los hidrocarburos en compuestos menos tóxicos, a través de su asimilación como fuente de carbono y energía. En este trabajo, el objetivo principal fue obtener consorcios definidos de bacterias con elevada capacidad para degradar mezclas de diésel y biodiésel, principal combustible contaminante presente en diversos suelos muestreados.Para ello se realizaron ensayos de compatibilidad por triplicado entre 13 cepas bacterianas previamente aisladas, identificadas y caracterizadas como degradadoras empleando la técnica de la doble capa de agar. La misma consistió en colocar 10 ml de Agar Nutritivo al 2% (m/v) en placas de Petri como capa inferior. Seguidamente, se sembraron por toque con ansa cuatro bacterias diferentes y se incubaron a 30ºC por 24 h. Transcurrida la incubación se adicionó la segunda capa (10 ml), la cual se preparó con Agar Nutritivo blando al 0,7% (m/v) fundido y atemperado al que se le adicionó 1x105 UFC/ml de concentración final de la bacteria sensible; seguidamente, los cultivos se incubaron a 30ºC por 16 h. La presencia de halos de inhibición reveló que la bacteria sensible fue inhibida por las bacterias de referencia situadas en lacapa inferior. A partir de los resultados obtenidos, y junto al conocimiento de las cepas de mayor capacidad biodegradativa, se diseñaron los cultivos mixtos definidos de bacterias biodegradadoras. Los mismos fueron evaluados in vitro en cuanto a su capacidad degradativa y comparados tanto con controles abióticos como con las bacterias individuales. Los ensayos se realizaron en matraces de Erlenmeyer de500 ml conteniendo 240 ml de medio salino de Bushnell-Haas (BH) con el agregado de micronutrientes y 10 ml de diésel comercial (mezcla diésel/biodiésel proporción90/10). A esta preparación, se le adicionó 7,5 ml del correspondiente cultivo mixto elaborado en una proporción equitativa en volumen entre los diferentes microorganismos integrantes del consorcio. Paralelamente, se realizaron también ensayos con los cultivos axénicos. Inmediatamente, los cultivos se incubaronpor 18 días a 30ºC con agitación orbital (250 rpm), controlándose periódicamente la degradación del combustible. Todos los ensayos fueron realizados por duplicado. Luego, el hidrocarburo remanente se extrajo por extracción discontinua líquido-líquido múltiple empleando n-hexano como solvente extractor y el porcentaje de degradación fue calculado gravimétricamente.Los resultados de los ensayos de compatibilidad mostraron una fuerte interacción entre las diferentes cepas lo que conllevó al armado de 14 consorcios formados por 3-5 cepas bacterianas degradadoras. Labiodegradación in vitro reveló rangos de degradación de entre 10-60% para cultivos de una cepa y de 20-85% para cultivos mixtos, por lo que el uso de consorcios microbianos representó una mejora en las tasas de degradación.