Desinfección de aguas mediante Radiación UV-C: Estudio del Daño en el ADN Bacteriano por ERIC-PCR

CRISTIANI, MARIANA; BRANDI, RODOLFO J.; LABAS, MARISOL; ROMERO, GABRIELA; TEDESCHI, FABIAN; FLORES, MARINA J.; ZALAZAR, FABIAN

Paraná

Congreso; 4to Congreso Bioquímico del Litoral y III Congreso Bioquimico del Nea,; 2017

Colegio Bioquimico Santa Fe y Colegio Bioquimico Entre Rios

La radiación UV-C es una técnica alternativa de desinfección del agua que carece de los efectos secundarios que produce la cloración convencional. Su eficacia se debe a que afecta directamente el material genético (ADN y ARN) de los microorganismos. En el presente trabajo se evaluó la utilidad de una variante de la PCR, conocida como ERIC-PCR, para analizar la inactivación de Escherichia coli (reflejada en el daño en el ADN bacteriano) durante la desinfección con radiación UV-C. Los ensayos de inactivación consistieron en colocar un cultivo de E. coli ATCC 8739 (1011 UFC/cm3) dentro de un reactor anular batch (con una capacidad de 2000 ml y una lámpara UV germicida Philips TUV 15W dispuesta en el eje axial) las cuales fueron irradiadas durante un tiempo total de 60 segundos. Con las muestras tomadas a distintos tiempos se realizó el recuento de colonias viables en agar EMB. A cada tiempo se extrajo y analizó el ADN de los microorganismos tratados mediante la técnica de ERIC-PCR, revelando los resultados mediante una electroforesis en gel de agarosa y un análisis densitométrico de las bandas formadas. Los recuentos bacterianos mostraron un 99.99% de inactivación a los 12 segundos de exposición a la radiación. Simultáneamente, en los ensayos de ERIC-PCR pudo observarse que, a medida que transcurre la reacción de inactivación, los perfiles de los productos de amplificación formados van cambiando: las bandas de mayor tamaño molecular se van atenuando hasta desaparecer. Como conclusión, en primer lugar, queda demostrado que el método de desinfección de aguas con radiación UV-C es altamente eficiente contra E. coli. Además la técnica utilizada para evidenciar el daño producido al ADN por radiación UV es apropiada, ya que permite observar el cambio en el patrón de las bandas en el gel, asociadas al proceso de inactivación.