Evaluación de los cambios en el ADN de Escherichia coli por UV-C en desinfección de agua.

FLORES, MARINA J.; BRANDI, RODOLFO J.; CRISTIANI, MARIANA; TEDESCHI, FABIAN; LABAS, MARISOL D.; ROMERO, GABRIELA; ZALAZAR, FABIAN

Santa Fe

Encuentro; XX Encuentro de Jóvenes Investigadores de la Universidad Nacional del Litoral.; 2016

Universidad Nacional del Litoral

Uno de los principales problemas de la humanidad en pleno siglo XXI es el acceso al agua potable y a medios adecuados de saneamiento. El consumo de agua contaminada sirve como vehículo de transmisión de innumerables enfermedades causadas por microorganismos patógenos.Los métodos convencionales de desinfección, tales como la cloración, a pesar de su eficacia, pueden reaccionar con la materia orgánica natural para formar una amplia gama de subproductos de desinfección, muchos de los cuales han sido identificados como cancerígenos y mutagénicos.La radiación UV está incluida como una técnica avanzada de desinfección del agua que evita los efectos secundarios de la cloración convencional. La eficacia de la radiación UV-C (253,7 nm, germicida), para la inactivación de un amplio rango de bacterias, virus y parásitos es debido a que afecta directamente el material genético ADN y ARN. A pesar que el efecto la radiación UV sobre el ADN de las bacterias es bien conocido, son muy escasos los trabajos que realicen un seguimiento del proceso de desinfección mediante la progresión del daño causado, que es la propuesta de este trabajo.Para el análisis del daño directo hacia el ADN se utiliza ampliamente la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), que permite amplificar el número de copias del segmento de ADN de interés. Una variante de la PCR clásica conocida como ERIC-PCR genera ADN fingerprints (huellas dactiloscópicas de ADN) que permite la discriminación entre cepas bacterianas. Los elementos ERIC son secuencias de DNA extragénicas, cortas, repetidas y esparcidas en el genoma de las enterobacterias; constan de 126 pb, con un repetido invertido central conservado. En esta técnica se emplean iniciadores que reconocen las secuencias conservadas ERIC, y las regiones amplificadas corresponden a los segmentos que separan dichas secuencias. Así, el polimorfismo generado dependerá de la variedad en la distribución de las repeticiones y de la distancia entre las secuencias ERIC dentro del genoma.En el presente trabajo evaluamos la utilidad del ERIC-PCR para analizar la inactivación de microorganismos por la radiación UV-C.