Detección de Toxoplasmosis Aguda mediante Inmunoaglutinación?

PERETTI, LEANDRO E.; GONZALEZ, VERÓNICA D.G.; COSTA, JUAN G.; MARCIPAR, IVAN S.; GUGLIOTTA, LUIS M.

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; X Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2014

Sociedad Argentina de Protozoología

Este trabajo describe la obtención de complejos látex-proteína (CLP) y su evaluación como reactivos de inmunoaglutinación para la detección de Toxoplasmosis aguda. Se emplearon partículas de látex de diferente tamaño y densidad de carga superficial (2 látex de poliestireno y 4 látex tipo ?core-shell? con funcionalidad carboxilo). Las partículas de látex fueron sensibilizadas con diferentes proteínas antigénicas del Toxoplasma gondii mediante adsorción física (AF) y unión covalente (UC). Los antígenos (Ags) empleados fueron 2 proteínas recombinantes de fase aguda del T. gondii, P35Ag y P22Ag, y el homogenato del parásito. Se observó que la mayor cantidad de proteína unida se obtuvo con las  proteínas recombinantes. La menor eficiencia de unión observada con el homogenato del parásito podría deberse a que se trata de una mezcla indefinida que incluye un gran número de proteínas de diferentes masas molares, puntos isoeléctricos y afinidades por la superficie de las partículas. Con el objetivo de estudiar la antigenicidad de las proteínas ligadas a las partículas, los CLP se evaluaron en ensayos de ELISA frente a sueros controles (clasificados por técnicas de referencia) negativos, agudos y crónicos. Los resultados mostraron que la antigenicidad de los Ags unidos a la superficie de las partículas no se vio afectada seriamente durante la sensibilización por AF y UC. Finalmente, los CLP se evaluaron en ensayos de inmunoaglutinación frente a un panel de sueros, donde la reacción de aglutinación se siguió midiendo los cambios en la absorbancia óptica por turbidimetría. Se construyeron curvas ROC, donde los grupos analizados fueron: i) sueros agudos (n=8) y ii) sueros negativos + crónicos (n=12). El área bajo la curva de los CLP-P35Ag y CLP-P22Ag fue de 0,927 y 0,881, respectivamente; indicando que estos reactivos serían capaces de discriminar los sueros agudos respecto a los crónicos y negativos.