INTEC   05402
INSTITUTO DE DESARROLLO TECNOLOGICO PARA LA INDUSTRIA QUIMICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Sintesis De Complejos Látex Proteína Con Diferentes Antígenos Para Detectar Toxoplasmosis Recientemente Adquirida
Autor/es:
PERETTI, LEANDRO E; GONZALEZ, VERÓNICA DG.; COSTA, JUAN G; MARCIPAR, IVÁN S.; GUGLIOTTA, LUIS M.
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Congreso; CONGRESO INTERNACIONAL DE METALURGIA Y MATERIALES SAM-CONAMET/IBEROMAT/MATERIA 2014; 2014
Institución organizadora:
Congreso Internacional de Metalurgia y Materiales
Resumen:
La toxoplasmosis es una enfermedad causada por el parásito Toxoplasma gondii, que afecta a un porcentaje importante de la población mundial. Si es adquirida durante la etapa de gestación, esta enfermedad puede transmitirse vía transplacentaria y provocar graves daños sobre el feto, por lo que resulta de suma importancia detectar la infección de manera temprana. El objetivo de este trabajo es obtener un kit de inmunoaglutinación (IA) capaz de detectar toxoplasmosis aguda. El desarrollo de un reactivo de IA se puede dividir en: i) la síntesis controlada de las partículas de látex; ii) la caracterización de los látex (medición de tamaños medios de partículas y su distribución, análisis superficial, estabilidad coloidal); iii) la obtención de las proteínas antigénicas; iv) la síntesis y caracterización de los complejos látex-proteínas (CLP); v) la evaluación de la antigenicidad de las proteínas ancladas sobre las partículas; y VI) la aplicación de los CLP en ensayos de IA. En este trabajo, se sintetizaron partículas de poliestireno carboxiladas con morfología ?core-shell?, diferente tamaño y densidad de carga superficial. Se trabajó con un Homogenato del parásito (mezcla de proteínas de composición indefinida); y 2 proteínas recombinantes de fase aguda (P35Ag y P22Ag). Los CLP se obtuvieron mediante adsorción física y unión covalente de las proteínas sobre las partículas. El mayor acoplamiento se obtuvo a un pH cercano al punto isoeléctrico de la proteína, donde se minimizan las repulsiones intra- e intermoleculares. Los resultados de ELISA permitieron corroborar que las proteínas conservan sus propiedades antigénicas después del proceso de sensibilización. Finalmente, se realizaron ensayos de IA enfrentando los CLP a sueros controles, clasificados como negativos, agudos y crónicos. Los CLP obtenidos por acoplamiento covalente de las proteínas recombinantes permitieron una buena discriminación de los sueros agudos, respecto de los crónicos y negativos.