Actividad antihelmíntica de diclorofen y nanopartículas de sílice modificadas con diclorofen sobre Echinococcus granulosus

FABBRI, JULIA; PENSEL, PATRICIA E; ALBANI, CLARA M; ARCE VALERIA B; MÁRTIRE DANIEL O; ELISSONDO, MARÍA C

Corrientes

Congreso; XXXVIII Jornadas Internacionales de Hidatidologia -XXXI Jornadas Nacionales de Hidatidosis; 2016

Asociación Argentina de Hidatidología

Diclorofen (DCP) es un antihelmíntico que fue utilizado en el tratamiento de algunas parasitosis intestinales, como las causadas por Taenia saginata, T. solium e Hymenolepis nana. Si bien la eficacia de esta droga fue evaluada sobre el estadio adulto de Echinococcus granulosus en perros, nunca fue estudiada sobre el estadio larval de este parásito. Debido a que DCP tiene baja solubilidad en agua y, por lo tanto, baja absorción luego de su administración oral, se diseñaron nanopartículas de sílice modificadas con diclorofen (NPDCP), con el objetivo de mejorar su biodisponibilidad en el tratamiento de parasitosis no intestinales. Por lo tanto, el objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto in vitro de DCP y NPDCP sobre protoescólices de E. multilocularis, como así también la eficacia clínica sobre el modelo murino de equinococosis. Los procedimientos y protocolos de manejo de animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio (RD 148/15) de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de la Universidad Nacional de Mar del Plata, Mar del Plata, Argentina. Para evaluar la eficacia in vitro, protoescólices extraídos de quistes obtenidos de ratones hembra CF1 infectados experimentalmente con E. multilocularis, fueron cultivados en medio 199 suplementado con glucosa y antibióticos y mantenidos en estufa a 37° C, en presencia de distintas concentraciones de DCP (5, 1 y 0.5 µg/ml), NPDCP (5, 1 y 0.5 µg/ml) y matriz de nanopartículas (NPF: nanopartículas free, 5 µg/ml), todos disueltos en DMSO. Se utilizaron como control protoescólices incubados en medio 199 con DMSO. La vitalidad de los protoescólices se realizó mediante el test de exclusión de azul de metileno. El mayor efecto protoescolicida se observó con DCP5 y NPDCP5, donde se observó 0% de vitalidad a las 24 horas postincubación (pi). Al comparar la eficacia de ambas formulaciones de DCP a las menores concentraciones, se observó un mayor descenso de la vitalidad con las NPDCP. Al tratar con DCP0.5 y NPDCP0.5 por 48 horas, las vitalidades observadas fueron 42 y 4.7%, respectivamente. Los protoescólices control y los tratados con NPF mantuvieron su vitalidad superior al 94% a lo largo de los 6 días del experimento.Para evaluar la eficacia in vivo, ratones hembra CF1 infectados experimentalmente con E. multilocularis, fueron separados en los siguientes grupos (10 animales por grupo): Control; DCP 4 mg/kg; NPDCP 4 mg/kg; NPF 4 mg/kg; y ABZ 25 mg/kg. El tratamiento, vía oral, comenzó a los 40 días pi y su duración fue de 30 días. Al finalizar el tratamiento, los animales fueron eutanasiados y necropsiados, previa anestesia. Se recuperaron los quistes de la cavidad peritoneal de cada ratón, se pesaron y sus pesos fueron comparados mediante un test estadístico no paramétrico (Prueba de Kruskal Wallis seguida de la prueba de comparación múltiple de Dunn). Se observaron diferencias significativas entre el grupo control y ABZ, y entre el control y NPDCP. La formulación de DCP como nanopartículas de sílice mostró una eficacia clínica similar a albendazole.