Estudio de aislados de pacientes fibroquisticos por tecnicas de ADN-fingerprinting y resistencia antibiotica

MARTINA, P.; BOSCH, A. ; PRIETO, C. ; MIÑÁN, A. ; ZAPPA, E.; BETTIOL, M.; MONTANARO, P.; YANTORNO, O.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología, VI Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínica (SADEBAC); 2010

Asociación Argentina de Microbiología

El complejo Burkholderia cepacia (CBC) es un grupo de bacterias estrechamente relacionado de 17 especies Gram-negativas, que se encuentran en suelo, ríos, invertebrados, plantas y animales. Representantes del CBC son patógenos oportunistas, capaces de causar serias lesiones con alta tasa de mortalidad en pulmones de pacientes con fibrosis quística (FQ) y en individuos inmunocomprometidos. El tratamiento de las infecciones del CBC plantea un gran reto debido a su alto nivel de resistencia antibiótica. Se ha atribuído la resistencia a los antibióticos ß-lactámicos a una ß-lactamasa cromosómica inducible, mientras que el mecanismo en fluoroquinonas se debe a la adquisición de mutaciones. En cultivos positivos para CBC, provenientes de esputo de pacientes fibroquísticos e inmunocomprometidos, B. contaminans fue aislada con la más alta frecuencia, en Argentina en los últimos años. El objetivo de este trabajo fue evaluar la resistencia antimicrobiana y diversidad genotípica en aislados sucesivos de pacientes fibroquísticos. Se analizaron 24 aislamientos, previamente identificados como B. contaminans por secuenciación del gen recA y RFLP, provenientes de 3 pacientes de Córdoba y 4 pacientes de La Plata. Se determinaron las MIC de ceftazidima, meropenem, minociclina, cotrimoxazol, azitromicina y ciprofloxacina para cada una de las muestras. Se evaluó la diversidad genética a través de BOX-PCR, ERIC-PCR y Rep-PCR fingerprinting. La técnica de rep-PCR DNA-fingerprinting es un método simple y rápido que posee el poder de resolución necesario para la identificación al nivel de subespecies o cepas. La tipificación molecular por DNA-fingerprinting reveló 4 perfiles genéticos. Cuatro de los pacientes presentaron aislados indistinguibles, un paciente presentó 2 perfiles distintos y los restantes pacientes presentaron perfiles únicos. Se observó incremento de la resistencia frente a los distintos antimicrobianos en los microorganismos aislados de cada paciente durante el transcurso del período estudiado. Cinco pacientes presentaron resistencia a minociclina y ciprofloxacina, dos pacientes a cotrimoxazol y un paciente a meropenem. Resultados similares han sido reportado por otros autores para Pseudomonas aisladas de FQ. En conclusión observamos aumento de resistencia antibiótica a lo largo del tiempo en la mayoría de los aislados B. contaminans analizados, esto podría deberse a que en los pacientes son medicados habitualmente con los mismo antibióticos en donde se hallo resistencia.Burkholderia cepacia (CBC) es un grupo de bacterias estrechamente relacionado de 17 especies Gram-negativas, que se encuentran en suelo, ríos, invertebrados, plantas y animales. Representantes del CBC son patógenos oportunistas, capaces de causar serias lesiones con alta tasa de mortalidad en pulmones de pacientes con fibrosis quística (FQ) y en individuos inmunocomprometidos. El tratamiento de las infecciones del CBC plantea un gran reto debido a su alto nivel de resistencia antibiótica. Se ha atribuído la resistencia a los antibióticos ß-lactámicos a una ß-lactamasa cromosómica inducible, mientras que el mecanismo en fluoroquinonas se debe a la adquisición de mutaciones. En cultivos positivos para CBC, provenientes de esputo de pacientes fibroquísticos e inmunocomprometidos, B. contaminans fue aislada con la más alta frecuencia, en Argentina en los últimos años. El objetivo de este trabajo fue evaluar la resistencia antimicrobiana y diversidad genotípica en aislados sucesivos de pacientes fibroquísticos. Se analizaron 24 aislamientos, previamente identificados como B. contaminans por secuenciación del gen recA y RFLP, provenientes de 3 pacientes de Córdoba y 4 pacientes de La Plata. Se determinaron las MIC de ceftazidima, meropenem, minociclina, cotrimoxazol, azitromicina y ciprofloxacina para cada una de las muestras. Se evaluó la diversidad genética a través de BOX-PCR, ERIC-PCR y Rep-PCR fingerprinting. La técnica de rep-PCR DNA-fingerprinting es un método simple y rápido que posee el poder de resolución necesario para la identificación al nivel de subespecies o cepas. La tipificación molecular por DNA-fingerprinting reveló 4 perfiles genéticos. Cuatro de los pacientes presentaron aislados indistinguibles, un paciente presentó 2 perfiles distintos y los restantes pacientes presentaron perfiles únicos. Se observó incremento de la resistencia frente a los distintos antimicrobianos en los microorganismos aislados de cada paciente durante el transcurso del período estudiado. Cinco pacientes presentaron resistencia a minociclina y ciprofloxacina, dos pacientes a cotrimoxazol y un paciente a meropenem. Resultados similares han sido reportado por otros autores para Pseudomonas aisladas de FQ. En conclusión observamos aumento de resistencia antibiótica a lo largo del tiempo en la mayoría de los aislados B. contaminans analizados, esto podría deberse a que en los pacientes son medicados habitualmente con los mismo antibióticos en donde se hallo resistencia.B. contaminans fue aislada con la más alta frecuencia, en Argentina en los últimos años. El objetivo de este trabajo fue evaluar la resistencia antimicrobiana y diversidad genotípica en aislados sucesivos de pacientes fibroquísticos. Se analizaron 24 aislamientos, previamente identificados como B. contaminans por secuenciación del gen recA y RFLP, provenientes de 3 pacientes de Córdoba y 4 pacientes de La Plata. Se determinaron las MIC de ceftazidima, meropenem, minociclina, cotrimoxazol, azitromicina y ciprofloxacina para cada una de las muestras. Se evaluó la diversidad genética a través de BOX-PCR, ERIC-PCR y Rep-PCR fingerprinting. La técnica de rep-PCR DNA-fingerprinting es un método simple y rápido que posee el poder de resolución necesario para la identificación al nivel de subespecies o cepas. La tipificación molecular por DNA-fingerprinting reveló 4 perfiles genéticos. Cuatro de los pacientes presentaron aislados indistinguibles, un paciente presentó 2 perfiles distintos y los restantes pacientes presentaron perfiles únicos. Se observó incremento de la resistencia frente a los distintos antimicrobianos en los microorganismos aislados de cada paciente durante el transcurso del período estudiado. Cinco pacientes presentaron resistencia a minociclina y ciprofloxacina, dos pacientes a cotrimoxazol y un paciente a meropenem. Resultados similares han sido reportado por otros autores para Pseudomonas aisladas de FQ. En conclusión observamos aumento de resistencia antibiótica a lo largo del tiempo en la mayoría de los aislados B. contaminans analizados, esto podría deberse a que en los pacientes son medicados habitualmente con los mismo antibióticos en donde se hallo resistencia.B. contaminans por secuenciación del gen recA y RFLP, provenientes de 3 pacientes de Córdoba y 4 pacientes de La Plata. Se determinaron las MIC de ceftazidima, meropenem, minociclina, cotrimoxazol, azitromicina y ciprofloxacina para cada una de las muestras. Se evaluó la diversidad genética a través de BOX-PCR, ERIC-PCR y Rep-PCR fingerprinting. La técnica de rep-PCR DNA-fingerprinting es un método simple y rápido que posee el poder de resolución necesario para la identificación al nivel de subespecies o cepas. La tipificación molecular por DNA-fingerprinting reveló 4 perfiles genéticos. Cuatro de los pacientes presentaron aislados indistinguibles, un paciente presentó 2 perfiles distintos y los restantes pacientes presentaron perfiles únicos. Se observó incremento de la resistencia frente a los distintos antimicrobianos en los microorganismos aislados de cada paciente durante el transcurso del período estudiado. Cinco pacientes presentaron resistencia a minociclina y ciprofloxacina, dos pacientes a cotrimoxazol y un paciente a meropenem. Resultados similares han sido reportado por otros autores para Pseudomonas aisladas de FQ. En conclusión observamos aumento de resistencia antibiótica a lo largo del tiempo en la mayoría de los aislados B. contaminans analizados, esto podría deberse a que en los pacientes son medicados habitualmente con los mismo antibióticos en donde se hallo resistencia.recA y RFLP, provenientes de 3 pacientes de Córdoba y 4 pacientes de La Plata. Se determinaron las MIC de ceftazidima, meropenem, minociclina, cotrimoxazol, azitromicina y ciprofloxacina para cada una de las muestras. Se evaluó la diversidad genética a través de BOX-PCR, ERIC-PCR y Rep-PCR fingerprinting. La técnica de rep-PCR DNA-fingerprinting es un método simple y rápido que posee el poder de resolución necesario para la identificación al nivel de subespecies o cepas. La tipificación molecular por DNA-fingerprinting reveló 4 perfiles genéticos. Cuatro de los pacientes presentaron aislados indistinguibles, un paciente presentó 2 perfiles distintos y los restantes pacientes presentaron perfiles únicos. Se observó incremento de la resistencia frente a los distintos antimicrobianos en los microorganismos aislados de cada paciente durante el transcurso del período estudiado. Cinco pacientes presentaron resistencia a minociclina y ciprofloxacina, dos pacientes a cotrimoxazol y un paciente a meropenem. Resultados similares han sido reportado por otros autores para Pseudomonas aisladas de FQ. En conclusión observamos aumento de resistencia antibiótica a lo largo del tiempo en la mayoría de los aislados B. contaminans analizados, esto podría deberse a que en los pacientes son medicados habitualmente con los mismo antibióticos en donde se hallo resistencia.Pseudomonas aisladas de FQ. En conclusión observamos aumento de resistencia antibiótica a lo largo del tiempo en la mayoría de los aislados B. contaminans analizados, esto podría deberse a que en los pacientes son medicados habitualmente con los mismo antibióticos en donde se hallo resistencia.B. contaminans analizados, esto podría deberse a que en los pacientes son medicados habitualmente con los mismo antibióticos en donde se hallo resistencia.