Efecto in vitro de agentes antimicrobianos en biofilms de aislados clínicos y ambientales de Burkholderia contaminans

Palais Rouge. Buenos Aires

Congreso; XII CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGÍA-VI Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología (SADEBAC); 2010

Asociacion Argentina de Microbiologia

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:595.3pt 841.9pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:35.4pt; mso-footer-margin:35.4pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> ESTE TRABAJO SE ENCUENTRA EN LA ETAPA FINAL DE PREPARACION. Las infecciones respiratorias causadas por el complejo Burkholderia cepacia (cBc) se asocian a un pronóstico no favorable en pacientes fibroquísticos (FQ). En los últimos años, B. contaminans ha sido la especie del cBc predominante tanto en muestras de esputo de pacientes FQ, como en productos de limpieza, farmacéuticos y de cuidado personal. A causa de la resistencia intrínseca del cBc a numerosos antibióticos, las opciones terapéuticas son limitadas. Asimismo la capacidad del cBc de crecer como biofilms en el pulmón incrementa su tolerancia a los antimicrobianos haciendo dificultosa su erradicación. El objetivo del presente estudio fue determinar la eficacia de antibióticos de uso habitual en el tratamiento de infecciones del cBc sobre la viabilidad de aislados clínicos y ambientales de B. contaminans creciendo en biofilms, evaluando en paralelo el eventual efecto disruptor. En este trabajo se emplearon 4 aislados de B. contaminans provenientes de esputo de pacientes FQ y del ambiente. La susceptibilidad a los antimicrobianos fue determinada por el método de microdilución en caldo Muller Hinton (MH). Los biofilms de B. contaminans fueron formados en placas multipocillos de poliestireno en caldo MH a 37 ºC por 48 h. El número total de células viables en el biofilm antes y después de la exposición al antimicrobiano fue determinado por recuento en placa. La cuantificación de la biomasa del biofilm antes y después del tratamiento antibiótico fue realizada por tinción con cristal violeta en placas de poliestireno y valorada espectrofotometricamente. Los resultados muestran que los antibióticos evaluados, con excepción de meropenem y ciprofloxacina, presentan una disminución en la actividad bactericida en biofilms de B. contaminans, comparado con su contraparte planctónica. Meropenem (8 mg/L) y ciprofloxacina (4 mg/L) exhibieron una disminución de células viables del biofilm > 99,9 % y de la biomasa total > 65 % en todos los aislados de B. contaminans. Los antimicrobianos cotrimozaxol, ceftazidima y minociclina, a concentraciones alcanzables durante la terapia antimicrobiana, mostraron una acción bactericida en células sésiles que osciló entre el 90 – 99% pero no presentaron efecto disruptor del biofilm en todo el rango de concentraciones evaluado. Los biofilms de aislados clínicos y ambientales mostraron una susceptibilidad semejante frente a los antibióticos ensayados. Los aislados de B. contaminans poseen una mayor resistencia a los antibióticos cuando forman biofilms a excepción de meropenem y ciprofloxacina, los cuales son igualmente efectivos frente a células planctónicas y sésiles. Asimismo estos dos antimicrobianos son capaces de reducir la biomasa del biofilm a concentraciones que pueden ser alcanzadas en la mucosa bronquial. Evidentemente estos resultados sugieren que ciprofloxacina y meropenem presentan ventajas sobre los demás antibióticos testeados al momento de implementar un tratamiento terapéutico en infecciones respiratorias de pacientes FQ.