Multilocus-sequence-typing de Pasteurella multocida proveniente de aves comerciales: nuevas perspectivas para el estudio del cólera aviar

GORNATTI CHURRIA, CARLOS; LANDONI, MARÍA FABIANA; PICOTTO, LEANDRO DANIEL; SGUAZZA, GUILLERMO HERNÁN

Ciudad Auntónoma de Buenos Aires

Jornada; IX Jornadas de Jóvenes Investigadores - 2019; 2019

Facultad de Ciencias Veterinarias UBA

El cólera aviar (CA) es una enfermedad producida por Pasteurella multocida que afecta a parvadascomerciales y causa grandes pérdidas económicas en la industria avícola mundial. P. multocida es unbacilo Gram (-), inmóvil, no esporulado, anaeróbico facultativo, agrupado en 5 serogrupos capsulares(A, B, D, E y F) y 16 serogrupos somáticos (1-16). El objetivo del presente trabajo fue caracterizarmolecularmente una selección de aislamientos de P. multocida por medio de la técnica de multilocussequence-typing (MLST). Se evaluaron un total de 8 aislamientos identificados como PM1, PM5,PM7, PM8, PM10, PM11, PM17 y PM19, que fueron obtenidos de parvadas comerciales consignología clínica, hallazgos macroscópicos y bacteriológicos compatibles con CA. Para ello, serealizó una extracción de ADN genómico de cada una de las cepas aisladas. Posteriormente, 7 genesconstitutivos de rutas enzimáticas (adk, aroA, deoD, g6pd, gdhA, mdh y pgi) fueron amplificados porPCR y secuenciados, de acuerdo al protocolo sugerido paraP. multocida (https://pubmlst.org/pmultocida/multihost/Pmultocida_MLST_Protocols.pdf).Los resultados de la secuenciación demostraron la presencia de nuevos alelos para cada uno de lossiete loci estudiados, numerados e identificados como 32 y 33 (adk), 33 y 43 (aroA), 28 (deoD), 30 y31 (g6pd), 30 y 31 (gdhA), 26 y 27 (mdh) y 39 (pgi). Del mismo modo, en nuestro estudio tambiénse encontraron nuevas combinaciones de alelos, denominadas secuencias tipo (ST) e identificadoscomo ST:78 (PM8), ST:79 (PM19) y ST:102 (PM11). Otros aislamientos, tales como PM1, PM7 yPM17, mostraron una coincidencia exacta con el ST:11, cuya combinación de alelos fue previamentereportado por otros investigadores en 35 ocasiones, en diferentes hospedadores (cerdos y conejos) ypaíses (Reino Unido, España y Portugal). Por su parte, PM5 mostró una combinación de aleloscorrespondiente con el ST:33 que fue únicamente encontrado en un caso previo de septicemia aviaren el Reino Unido, mientras que PM10, se correspondió con el ST:10, que fue reportado por primeravez en aves comerciales en todo el mundo. En conclusión, el MLST es un método molecular capazde proveer información sobre la evolución bacteriana y la epidemiología local o global deenfermedades bacterianas. El presente estudio identificó por primera vez a ST:10 y ST:11 en avescomerciales, que únicamente habían sido reportados en cerdos y conejos en Europa. Este hallazgopermite considerar a los conejos como nuevo potencial reservorio de P. multocida patógena paraparvadas comerciales. Se reveló la estrecha relación entre aislamientos de P. multocida de avescomerciales en Argentina con otros aislamientos obtenidos de mamíferos clarificando la asociaciónde ambos tipos de hospedadores afectados por dicha bacteria. Se considera que futurasinvestigaciones son necesarias para continuar con la caracterización molecular de P. multocida enparvadas de aves comerciales en Argentina a fin de establecer posibles estrategias de control regionaly la posible erradicación de la enfermedad.