Desarrollo y evaluación de nanopartículas lipídicas funcionalizadas conteniendo 1,8-cineole como nueva terapia en el tratamiento sitio-específico de distintos tipos de cáncer

DE VERTI IP; RODENAK-KLADNIEW B; CASTRO GR; NOACCO N; ISLAN GA

La Plata

Jornada; Jornadas de Investigación 2018 Facultad de Ciencias Médicas (UNLP)); 2018

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA - Facultad de Ciencias Médicas

El cáncer es la segunda causade muerte a nivel global luego de las enfermedades cardiovasculares. A pesar delos significativos avances realizados en los últimos, muchas de las terapiasactuales siguen resultando ineficaces y con efectos secundarios altamentetóxicos. Estas limitaciones suelen estar asociadas a la inespecificidad deacción de los antitumorales convencionales, que afectan tanto a las célulastumorales como a los tejidos normales. En este contexto, nuevas y más eficacesterapias son necesarias. Las nanopartículaslipídicas sólidas (NLS) han sido desarrolladas como herramientas muy potentes parala encapsulación eficiente de compuestos lipofílicos, con el objetivo demejorar su biodisponibilidad en medios fisiológicos. Compuestos naturalesliposolubles como curcumina, quercetina, gingerol, linalool, geraniol entreotros, son de gran interés debido a sus propiedades antitumorales y su bajatoxicidad general, lo que los convierte en moléculas propicias para suincorporación en NLS, ya sea actuando como agentes quimioterapéuticos únicos, oen combinación con drogas de referencia (paclitaxel, doxorrubicina, etc). A suvez, las NSL son altamente versátiles, ya que la superficie de las mismas puedeser funcionalizada por adición de moléculas (anticuerpos o ligandos) quefavorezcan la unión específica de las NLS a la superficie de distintos tiposcelulares y su posterior internalización. Estos sistemas presentan un granpotencial para el desarrollo de nuevas terapias más específicas que permitanreemplazar y/o complementar los tratamientos vigentes. Objetivos: El objetivo general de estetrabajo es desarrollar NLS biocompatibles funcionalizadas que sirvan comovehículo de componentes bioactivos con actividad anticancerígena, para eltratamiento sitio-específico de células tumorales. El objetivo particular esdesarrollar NLS conteniendo 1,8-cineole (como modelo de compuesto natural conpropiedades antitumorales), las cuales a su vez transportan nanopartículasmagnéticas (maguemita) como potencial herramienta para la sitio-dirección delas mismas, y cuya superficie está recubierta por quitosano (biopolímerocatiónico lineal con afinidad por los receptores CD44, altamentesobre-expresados en varios tipos de células tumorales).Materiales y métodos:Se sintetizaron NLS por elmétodo de ultrasonicación ya descripto en trabajos previos. Se utilizó miristilmiristato como lípido neutro de matriz, 1,8-cineole (CN, bioactivo),nanopartículas magnéticas (MNP) y surfactante Pluronic F68. La cobertura de lasuperficie de las NSL con quitosano (Qt) se realizó adicionando una disoluciónde Qt a la fase acuosa que posee el surfactante. Se caracterizaron las propiedadesfisicoquímicas de las distintas formulaciones obtenidas (NLS-CN, NLS-CN-Qt yNLS-CN-Qt-MNP) mediante la determinación del tamaño de partícula y potencial Z(DLS, TEM) y análisis de superficie (TEM). El efecto antitumoral (ensayo deMTT) y captación intracelular (microscopía de fluorescencia) de las distintasNLS se evaluaron in vitro en célulastumorales HepG2 (hepatocarcinoma celular, baja expresión del receptor CD44) ycélulas A549 (adenocarcinoma de pulmón, alta expresión de CD44).Resultados: Lasnanopartículas mostraron forma esférica en el rango de 190-270 nm, con una dispersiónde tamaños moderada-baja y carga superficial de -2.0 mV (NLS-CN), +7.0 mV(NLS-CN-Qt) y +10.0 mV (NLS-CN-Qt-MNP). Las NLS-CN-MNP   mostraronrespuesta magnética al exponerlas a un campo magnético (imán). Todas lasformulaciones conteniendo CN demostraron inhibir la proliferación de células HepG2y A549 de manera eficaz, en algunos casos de manera más efectiva que el CNlibre (vehiculizado en etanol). La captación intracelular de las distintas NLSconteniendo una sonda fluorescente (DioC18) se vio potenciada en lasformulaciones revestidas con Qt, principalmente en células A549. Conclusiones: Las formulacionesdesarrolladas presentan un gran potencial como herramientas biocompatiblesinnovadoras, alternativas y complementarias en el tratamiento sitio-específicode tumores a partir de su capacidad de ser dirigidas al sitio de acción por suspropiedades magnéticas, de unirse específicamente a moléculas de superficiesobre-expresadas en tumores y de ser internalizadas eficientemente en lasmismas.