Formación de biofilm por Bordetella pertussis. Un enfoque por métodos espectroscópicos

OSVALDO YANTORNO; DIEGO SERRA; ALEJANDRA BOSCH

Auditorio de la Fundación Instituto Leloir.

Taller; Taller Integrativo sobre Biofilms; 2008

Fundación Instituto Leloir

Formación de biofilm por Bordetella pertussis. Un enfoque por métodos espectroscópicos   Osvaldo Yantorno, Diego Serra y Alejandra Bosch   Centro de Investigación y Desarrollo de Fermentaciones Industriales (CINDEFI, CONICET), Facultad de Ciencias Exactas, 47 y 115, La Plata (1900), Argentina. E-mail: yantorno@quimica.unlp.edu.ar   El conocimiento de la dinámica de crecimiento y variación fenotípica asociada al mismo, de patógenos bacterianos dentro de hospedadores infectados es un aspecto de fundamental importancia biológica en general y de relevancia médica en particular, con importantes consecuencias para el control de estas infecciones. En el caso de procesos bacterianos persistentes las variaciones bacterianas dentro del hospedador representan un importante aspecto vinculado con los mecanismos de adaptación del patógeno y su evolución. Estos procesos infecciosos están asociados con una extensa adaptación genética y micro-evolución de la bacteria infectante. El empleo de modelos para el crecimiento in vitro, conjuntamente con el empleo de metodologías que permitan el monitoreo de los cambios fenotípicos asociados a la adhesión y desarrollo de poblaciones en biofilm, requiere de instrumentación que permita la adquisición y procesamiento de la información en tiempos reales. Durante las dos últimas décadas la espectroscopia vibracional, y en particular la espectroscopia infrarroja con transformada de Fourier (FT-IR) ha demostrado ser una poderosa herramienta analítica para el monitoreo del crecimiento en biofilm de manera no destructiva. En esta presentación se describirán espectrómetros FT-IR y FT-Raman y formas de adquirir y procesar los datos espectrales (se describirán diferentes software), a fin de obtener información química proveniente del monitoreo de células adheridas a soportes sólidos en sistemas de cultivo con flujo continuo de nutrientes. Se correlacionará la información espectral con la composición macromolecular a partir de resultados obtenidos del crecimiento de Bordetella pertussis (agente etiológico de tos convulsa), adherida a soportes abióticos. Se compararán fenotipos de células sésiles con sus contrapartes planctónicas (crecidas sin y con limitación de nutrientes y a distintas velocidades de crecimiento).