Producción de proteínas rábicas recombinantes para su uso en medicina veterinaria

CAVALITTO, SEBASTIÁN FERNANDO; PICOTTO, LEANDRO DANIEL; PECORARO, MARCELO RICARDO; SGUAZZA, GUILLERMO HERNÁN

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Simposio; Simposio Argentino sobre rabia; 2016

Fundación Pablo Cassará

El control de la rabia, una zoonosis que constantemente produce casos fatales en humanos y animales, depende del buen funcionamiento de sistemas de vigilancia de la circulación viral y de una vacuna eficaz que impida su propagación. La mayoría de las vacunas de rabia usadas en la actualidad son a virus inactivado, producidas a partir de tejidos o células infectadas. Estas son bastante seguras y pueden ser utilizadas con uso profiláctico sin temor a efectos secundarios. Sin embargo, el proceso de producción es caro y está compuesto por varios pasos donde deben manejarse grandes cantidades de material infeccioso. Esto ha generado la necesidad de desarrollar nuevos tipos de vacunas antirrábicas de bajo costo, seguras y efectivas. Por ello, una alternativa a evaluar es la producción de proteínas rábicas recombinantes para la obtención de antígenos virales.El objetivo de este trabajo fue expresar la glicoproteína del virus de la rabia en Pichia pastoris. A tal fin, el gen de la glicoproteína G del virus rábico, cepa vacunal CVS-51, fue ligado al vector pPIC9 e introducido en P. pastoris GS115. Se realizaron cultivos en pequeña escala y se midió el nivel de expresión mediante SDS-PAGE observándose la banda correspondiente a la glicoproteína. Además, la glicoproteína recombinante mostró reaccionar de la misma manera que la glicoproteína nativa cuando se la enfrentó a anticuerpos específicos en un ensayo de Western Blot.Los datos indican que la glicoproteína recombinante puede ser expresada de manera sencilla. Dicha proteína podría ser utilizada como fuente segura de antígeno en la producción de sistemas aplicados al diagnóstico y de una vacuna a subunidades para la prevención de la enfermedad.