Actividad in vitro de aislamientos nativos de Purpureocillium lilacinus sobre huevos de Nacobbus aberrans

GORTARI, M.C.; HOURS, R.A.

CABA

Congreso; III Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental (CAMAYA 2015); 2015

Asociación Argentina de Microbiología

ACTIVIDAD IN VITRO DE AISLAMIENTOS NATIVOS DE PURPUREOCILLIUM LILACINUM SOBRE HUEVOS DE NACOBBUS ABERRANSGortari MC1,2, Hours RA21Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires (CIC-PBA)2Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales (CINDEFI; UNLP, CONICET-La Plata). Facultad de Ciencias Exactas, UNLP. 47 y 115 (B1900ASH) La Plata.Purpureocillium lilacinum es un hongo natural del suelo con actividad antagónica sobre huevos y hembras de fitonematodos agalladores de la raíz. Entre estos, Nacobbus aberrans es uno de los que más afecta a una gran diversidad de cultivos en nuestro país. Su control se basa fundamentalmente en el uso de agroquímicos. Una alternativa más ?amigable? desde el punto de vista ambiental es el control biológico utilizando antagonistas nativos. El objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad de tres aislamientos nativos: P. lilacinum LPSC # 876 (aislado de suelo de espacio verde) y P. lilacinum Ls y Pv (de suelo con actividad hortícola) sobre huevos de N. aberrans.La suspensión conidial se obtuvo a partir de cultivos de P. lilacinum (LPSC # 876, Ls y Pv) sobre agar papa dextrosa a 28±1ºC durante 10 días. Las conidias se resuspendieron con Tween al 0,1% y la suspensión conidial se ajustó a una concentración de 1 × 106 conidias/ml. Se calculó el porcentaje de germinación cultivando 10 µl de la suspensión conidial/aislamiento sobre agar agua al 1% en cámara húmeda (16-24 h). La suspensión de huevos de N. aberrans se obtuvo por disolución de masas de huevos obtenidas de raíces de plantas de tomate platense infectadas experimentalmente y mantenidas en invernáculo. Se realizó el recuento de los huevos/ml a partir de una alícuota (10 µl) bajo microscopio estereoscópico. El proceso de infección se realizó en cajas de Petri conteniendo agar agua al 1% en las que se colocaron, y diseminaron con ansa microbiológica, 10 µl de la suspensión de huevos y de la suspensión conidial. Cada aislamiento fue evaluado por triplicado. Como control se utilizaron placas inoculadas con 10 µl de la suspensión de huevos y de conidias más 10 µl de agua destilada estéril. Las placas se cultivaron en oscuridad a 28±1ºC y fueron evaluadas diariamente durante una semana bajo microscopio estereoscópico y microscopio óptico. Se evaluaron los porcentajes de eclosión, larvas móviles y de huevos infectados.La germinación de P. lilacinum fue del 87-100%. El inóculo de N. aberrans estuvo constituido por huevos de diversos estadios embrionarios. El porcentaje inicial de eclosión osciló entre 3,3 y 7,9% y de larvas móviles entre 1,47 y 5,94%. A las 48 h ya se observaron huevos con signos de infección. Entre las 48 y 72 h se detectó desarrollo de conidióforos y producción de conidias y entre un 75 y 86% de los huevos presentaban signos variables de infección mientras que los estadios larvarios permanecían normales. A los 7 días se observaron estructuras fúngicas de reproducción completamente desarrolladas y entre un 80-100 % de parasitismo sobre los huevos. La eclosión se mantuvo dentro de los niveles iniciales y las larvas no mostraron signos de infección indicando que los huevos en su primera fase de la embriogénesis son más sensibles. No se observaron diferencias significativas en la actividad fúngica entre los 3 aislamientos respecto de la eclosión y el parasitismo bajo las condiciones del ensayo.Los aislamiento de P. lilacinum manifestaron actividad antagónica contra huevos de N. aberrans independientemente del origen del aislamiento y pueden considerarse como potenciales agentes de control biológico de este fitoparásito.