La fagocitosis y sobrevida intracelular de Bordetella pertussis en ausencia de anticuerpos específicos es dependiente de colesterol

LAMBERTI, Y.; PEREZ VIDACOVIKS, M. L.; RODRIGUEZ, ME

Mar de Plata

Congreso; Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI).; 2006

Sociedad Argentina de Inmunología/ Sociedad Argentina de Inmunología Clínica

Bordetella pertussis (Bp) es el agente causal de tos convulsa, una enfermedad que no ha podido ser erradicada. Estudios previos sugieren que, a diferencia de lo que ocurre en presencia de anticuerpos específicos, en huéspedes no inmunes este patógeno podría evadir la actividad celular bactericida. El objetivo de este trabajo fue caracterizar la interacción bacteria-célula fagocítica en condiciones no opsonizantes. Se emplearon sondas fluorescentes y bacterias marcadas con GFP para evaluar la adhesión y fagocitosis bacterianas por citometría de flujo y microscopía de fluorescencia. La sobrevida intracelular se determinó por ensayos de protección a polimixina B, y el tráfico a lisosomas se evaluó por microscopía confocal. La comparación de medias se llevó a cabo mediante ANOVA o t-Student (p<0.05), según el caso. La extracción de colesterol de neutrófilos humanos (PMN) mediante metil-b-ciclodextrina (cd-PMN) determinó una disminución media del 70±5 % en la adhesión y del 30±3% en la fagocitosis de Bp, respecto al control sin tratar. Sin embargo no afectó el nivel de adhesión o fagocitosis de bacterias opsonizadas, indicando no solo distinta vía de interacción en presencia de anticuerpos, sino también que el tratamiento no afecta la funcionalidad de los PMN. Bp no opsonizada, fagocitada por PMN, presentó una viabilidad intracelular 10 veces mayor que Bp opsonizada. Sin embargo esta sobrevida se vio significativamente disminuida (70±10%) en los casos de fagocitosis por cd-PMN. Paralelamente, ensayos de colocalización bacteriana con LAMP-1 demostraron que en ausencia de anticuerpos Bp inhibe su tráfico a lisosomas, a diferencia de lo observado en bacterias opsonizadas o en bacterias no opsonizadas fagocitadas por cd-PMN. Estos resultados indican que en condiciones no inmunes Bp es capaz de sobrevivir a la interacción con PMN y que dominios ricos en colesterol estarían implicados en esta sobrevida.