“Análisis de la interacción de capa S de Lactobacillus kefir con iones metálicos mediante FTIR”

ESTEBAN GERBINO, PABLO MOBILI, EMMA E. TYMCZYSZYN, RUI FAUSTO, ANDREA GÓMEZ ZAVAGLIA.

La Plata

Encuentro; Tercera Reunión de Coordinación de la Red Temática CYTED (108RT0362); 2010

Programa CYTED (CIDCA)

La capa-S constituye la capa proteica más externa que envuelve la pared celular de ciertos microorganismos. Entre las bacterias lácticas, su presencia ha sido demostrada en numerosas especies de lactobacilos, entre las que se encuentran L. kefir y L. parakefir [1]. Las proteínas de capa-S de algunas bacterias han mostrado la capacidad de unir iones metálicos. Esta observación presenta un especial interés por sus eventuales aplicaciones en el campo de la biorremediación y la nanotecnología [2]. El presente trabajo tuvo como objetivo principal el estudio de la interacción de proteínas de capa-S de L. kefir con iones metálicos de interés ambiental o para la salud. Se utilizaron dos cepas de Lactobacillus kefir: CIDCA 8348 y JCM 5818. Ambas cepas presentan diferentes propiedades de superficie y sus proteínas de capa S poseen diferentes pesos moleculares, estructuras secundarias, grado de glicosilación e inmunoreactividad [3,4]. La interacción de proteínas de capa S con iones metálicos (Al+3, Cd+2, Ni+2, Pb+2 y Zn+2) fue estudiada mediante espectroscopía de infrarrojo por transformadas de Fourier (FTIR). Para ello se resuspendió 1 mg de capa S liofilizada en 1 ml de H2O milli-Q o en sales (nitratos) de los metales mencionados (concentración final: 0.3 mM). Se incubó  durante 24 h a 30 ºC. Luego de la incubación, la mezcla fue centrifugada a 6600 g durante 4 minutos y el pellet fue conservado para las determinaciones de FTIR. Se colocaron 30 ml de pellet sobre una ventana de CaF2 y se secó bajo corriente de aire a 50 ºC. Los espectros se registraron por transmisión en un equipo BOMEM MB40 con detector DTGS purgado con aire seco, mediante la acumulación de 128 escaneos con una resolución de 4 cm-1. Los resultados obtenidos demostraron que la interacción capa S - ion metálico ocurre a través de los grupos COO-. Esta interacción induce alteraciones en la estructura secundaria de la proteína, las cuales pueden correlacionarse con el radio iónico de los metales en estudio.