Desarrollo de un modelo vegetal para evaluación de efecto tóxico de toxinas cianobacterianas presentes en el Río de la Plata

VENTOSI, EZEQUIEL; JUÁREZ, IVAN; GIANNUZZI, LEDA; OLIVER, CRISTIAN; ARANDA, OSWALDO; SEDAN, DANIELA; ROSSO, LORENA; CRETTAZ-MINAGLIA, MELINA CELESTE; ANDRINOLO, DARÍO

Córdoba

Congreso; VI Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental; 2016

Sociedad Argentina de Toxicología y Química Ambiental

Las fuentes de agua dulce empleadas para el riego de cultivos son susceptibles de presentar florecimientos de cianobacterias productoras de toxinas, debido a diversas condiciones climáticas y de eutrofización. La exposición a las cianotoxinas podría generar alteraciones sobre especies vegetales de interés alimenticio o ambiental. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un modelo vegetal sobre el cual evaluar el efecto de las cianotoxinas más frecuentemente halladas en nuestra región, Microcystina-LR (MC-LR) y su variante DLeu1-Microcystina-LR (D-Leu1). Semillas de Phaseolus vulgaris fueron expuestas por única vez durante la etapa de imbibición (24 hs) a 800μl de solución acuosa de 3,5ppm y 15ppm de MC-LR o D-Leu1, empleando agua libre de toxinas como control. Luego se cultivaron en condiciones adecuadas (24ºC, luz/oscuridad:􀏭􀏰/􀏭􀏬hs.,à 􀏰􀏮􀊅􀅵ol.􀅵-2.s-1) durante 10 días, regadas diariamente con agua libre de toxinas. Se realizaron observaciones macroscópicas diarias y finalizado ese período se tomaron muestras de raíces, hojas, tallos y cotiledones; se homogeneizaron con buffer fosfato pH 7,2 y se determinaron proteínas totales, clorofila, peroxidación lipídica (TBARs) y toxina libre (HPLC-MS). Al día 1 se redujo la tasa de germinación (12% y 50% con 3,5ppm de MC-LR y D-Leu1; 75% y 100% con 15ppm de MC-LR y D-Leu1 respectivamente) respecto del control. El desarrollo de plántulas tratadas con 15ppm de MC-LR y D-Leu1 se vio disminuido en 25% y 83,3% respectivamente, en comparación con el control. Así mismo se observaron alteraciones morfológicas en raíces (aumento de raíces laterales y disminución de pelos absorbentes) y hojas (alteración de bordes, disminución del tamaño y clorosis), efectos que fueron dosis y congénere dependiente. La mayor afectación se dio en aquellas semillas expuestas a D-Leu1. Los niveles de clorofila a, b y total fueron menores que los controles en todos los tratamientos, mientras que la peroxidación lipídica aumentó significativamente en los tratamientos con 15 ppm de toxina, siendo mayor para D-Leu1, esto último vinculado con el mecanismo de acción de las toxinas. Se detectó toxina libre en todas las estructuras de la planta. Este modelo vegetal de exposición única resulta adecuado para el estudio de efectos de cianotoxinas, ya que no requierecondiciones complejas de cultivo, es una semilla de desarrollo relativamente rápido y de fácil acceso; y permite detectar efectos tóxicos de Microcystinas aún luego de una única exposición.