Síntesis de péptidos inmunoreactivos sobre soporte de celulosa

BARRIOS IVANA; CURCIARELLO RENATA; PETRUCCELLI SILVANA; DOCENA GUILLERMO H.; BRUNO-BLANCJ LUIS

Los Cocos, Cordoba

Workshop; Tercer Wrokshop Argentino de Quimica Medicinal; 2008

En Argentina, la leche bovina es el principal alergeno alimentario, observándose esta patología en los primeros años de vida. Por razones económicas la leche de soja es el principal sustituto empleado. Sin embargo, se ha detectado que aproximadamente un 20-40 % de los pacientes alérgicos a la leche de vaca manifiestan también reacciones adversas a las proteínas de la soja, aún sin haberlas ingerido previamente.1 En este trabajo se presenta la obtención de distintas secuencias aminoacídicas mediante síntesis química en fase sólida (spot synthesis)2utilizando como soporte papel de celulosa. Sobre la base de resultados previos del grupo se diseñaron 3 péptidos cuyas secuencias están presentes en distintas glicininas de soja, para identificar posibles epitopes inmunoreactivos. Las reacciones se conducen de manera de obtener en cada reactor (mancha o spot) el péptido buscado. Este soporte facilita la determinación de la actividad alergénica in situ. 2 OH OH 1.Pegado Linker 3.Elongación HN CH C CH3 O OO OC H2 Celulosa 2. Piperidina-desprotección Acoplamiento Desprotección Moléulas de péptidos individuales 1-500 manchas 4. Corte del papel y liberación de algunos peptidos 5.Analisis por HPLC-Masas 6.Ensayos inmunológicos peptidos anclados Esquema 1. Esquema general del proceso. Las etapas sintéticas son llevadas a cabo empleando sucesivas reacciones de desprotección-acoplamiento según metodología Fmoc (Esquema 1).2La estructura de los péptidos se realiza por HPLC-Masas y UV-MALDI-TOF. Empleando sueros policlonales específicos de caseínas bovinas, observamos que los 3 péptidos obtenidos son capaces de ser reconocidos por los anticuerpos. Estos resultados sugieren que los 3 péptidos podrían comportarse en la molécula nativa como epitopes inmunoreactivos, dado que además se localizan en la superficie de las mismas. Esto podría explicar las reactividades cruzadas previamente estudiadas. Bibliografía: 1 Kirsi-Marjut, Järvinen, et.all .J. Allergy Clin. Immunol.;10(2), (2002), 293. 2 Frank, R. J.Inmunol.Meth., 267, (2002), 13.Agradecimiento:BIABecaria Post Doctoral CONICET ; ª,b Universidad Nacional de La Plata.