CIDCA 05380
CENTRO DE INVESTIGACION Y DESARROLLO EN CRIOTECNOLOGIA DE ALIMENTOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis de poblaciones celulares linfoides y mieloides en mucosa de intestino delgado humano
Autor/es:
MEIER D; CAGNOLA H; FAUDA M; RUF A; GONZALEZ CAMAPANA A; DOCENA G; CHIRDO F; RUMBO M; GONDOLESI G
Lugar:
La Falda, Cordoba
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y Grupo Rioplatense de citometría de flujo; 2008
Resumen:
<!--
/* Style Definitions */
p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal
{mso-style-parent:"";
margin:0cm;
margin-bottom:.0001pt;
mso-pagination:widow-orphan;
font-size:12.0pt;
font-family:"Times New Roman";
mso-fareast-font-family:"Times New Roman";}
@page Section1
{size:595.3pt 841.9pt;
margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm;
mso-header-margin:35.4pt;
mso-footer-margin:35.4pt;
mso-paper-source:0;}
div.Section1
{page:Section1;}
-->
El intestino delgado se caracteriza por la presencia de
tejido linfoide organizado con funciones inductoras de respuesta inmune: Placas
de Peyer y folículos linfoides aislados. Por otra parte, en la lámina propria
existen distintas poblaciones leucocitarias con capacidad de inducción de
respuesta inmune, funciones efectoras y regulatorias. Gran parte del
conocimiento ha sido generado en ratón, siendo muy escasa la información
disponible de intestino delgado humano.
El objetivo de este trabajo fue optimizar la metodología de
análisis de poblaciones celulares leucocitarias de mucosa intestinal humana.
Se estudiaron piezas quirúrgicas removidas de distintas
porciones de intestino delgado (n total= 27, duodeno n= 5, yeyuno n=7, ileon distal
n=15) provenientes de 12 pacientes pediátricos y 10 adultos. Se optimizó un
protocolo de separación mecánica de las capas muscular, submucosa y mucosa que
permitió identificar estructuras linfoides de pequeño tamaño. El tratamiento de
la mucosa con EDTA, colagenasa y DNAsa permitió obtener una suspensión celular
de la lamina propria y del compartimiento epitelial. Se realizaron además
estudios histológicos e inmunohistoquímicos.
Estudios por microscopía evidenciaron la presencia de
numerosos folículos aislados dispersos (duodeno e ileon) y agrupados formando
placas de Peyer (ileon terminal). Estas estructuras se caraterizaron por
inmunohistoquímica y microscopía de fluorescencia, observando acúmulos de
células CD20+ y células dispersas CD3+, CD4+, CD45RO+ en estructuras
compatibles con folículos linfoides aislados maduros. Ocasionalmente se
encontraron vellosidades con hipercelularidad linfocitaria (Lymphocyte filled villi).
Por citometría de flujo se estudiaron las poblaciones
linfoides mayoritarias del compartimiento epitelial (células T CD8+,
correspondiendo a linfocitos intraepiteliales). En lamina propria, se
detectaron poblaciones CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD20+CD19+, CD20-CD19+ así como macrófagos
(HLA-DR+ CD11c+ CD11b+ CD14+) y células dendríticas (LIN FITC- HLA-DR+ CD11c+ y
LIN FITC- HLA-DR+ CD123+).
Mediante los protocolos optimizados (disección en capas de
la pared intestinal, digestión enzimática y citometría de flujo, microscopía óptica
y de fluorescencia) se han identificado y caracterizado estructuras linfoides en
un tejido aún poco estudiado. La metodología desarrollada nos permite a su vez identificar
e estudiar las poblaciones relevantes de lamina propria de intestino delgado
humano.
