La infección con Brucella no induce quemoquinas ni TNF alfa en células epiteliales alveolares tipo II humanas

FERRERO MARIANA; DOCENA GUILLERMO; RUMBO MARTÍN; FOSSATI CARLOS; BALDI PABLO

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LIV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006

SAI y SAIC

Distintos patógenos respiratorios inducen la producción de quemoquinas y citoquinas proinflamatorias por el epitelio pulmonar. Aunque la infección por Brucella puede adquirirse por mucosa respiratoria, no se ha evaluado la interacción de esta bacteria con el epitelio alveolar. Investigamos la capacidad de distintas cepas de Brucella para infectar e inducir la secreción de citoquinas en una línea de células alveolares humanas tipo II (A549). Para ello las células fueron infectadas durante 14 hs. con B. abortus 2308 (cepa virulenta lisa), B. abortus RB51 (vacunal rugosa) y B. canis (virulenta rugosa) a una relación de 150 bacterias/célula. A las 2, 24 y 48 hs. posinfección (p.i.) se cuantificaron las bacterias intracelulares por ensayos de protección con gentamicina y plaqueo en medio nutritivo. Todas las cepas ensayadas se adhieren e invaden las células A549. La adherencia de B. abortus RB51 es significativamente mayor que la de la cepa lisa (1,1±0.1 x10(6) vs. 2.5±0.2 x10(5) UFC/pocillo), y lo mismo ocurre con la invasión (1.4±0.09 x10(5) vs. 1.2±0.1 x10(3) UFC/pocillo). Sin embargo, sólo la cepa lisa logra replicarse intracelularmente (1.1±0.8 x10(4) y 6.5±0.2 x10(5) UFC/pocillo a las 48 hs. p.i. para B. abortus rugosa y lisa, respectivamente). Notablemente, ninguna infección incrementó significativamente la producción de las quemoquinas IL8 y MCP-1 ni de TNF-a. A las 24 hs. p.i., sus niveles en sobrenadantes de cultivo de células infectadas con cepa lisa y células no infectadas fueron 1039±9.4 vs. 1050±57 pg/ml, 874±13 vs. 839±16 pg/ml, y 0±0 vs. 0±0 pg/ml, respectivamente. En cambio, en las células estimuladas con flagelina de Salmonella typhimurium los niveles quemoquinas fueron incrementados. Estos resultados muestran que Brucella es capaz de invadir y replicarse en células epiteliales alveolares sin inducir la producción de quemoquinas y TNF-a, lo cual podría constituir un mecanismo de evasión inmunitaria.