Activación de macrófagos murinos (Raw 264.7) infectados con C. rodentium en presencia de Lactobacillus delbrueckii susp. lactis (cepa CIDCA 133).

115 HUGO, A.; ROLNY, I. S. Y PÉREZ, P. F.

Congreso; LIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2011

Una de las principales funciones de los macrófagos es su capacidad de endocitar bacterias. Luego de la fagocitosis se desencadenan eventos que conducen al aumento de la expresión de moléculas de superficie y a la activación celular. Los lactobacilos han sido ampliamente utilizados como probióticos debido a sus efectos benéficos sobre la salud del hospedador entre los que se encuentran la activación de macrófagos y linfocitos. En el presente trabajo se evaluó la capacidad fagocítica y de activación de las células Raw 264.7 frente a la infección con C. rodentium en interacción con la cepa Lactobacillus delbrueckii susp. lactis (CIDCA 133). Las células Raw se incubaron durante una hora en presencia de las bacterias. La fagocitosis se evaluó mediante citometría de flujo utilizando C. rodentium marcado con isotiocianato de fluoresceína. La fluorescencia externa de las bacterias asociadas se apantalló mediante la adición de azul tripán al 2% v/v. En el resto de los ensayos se prosiguió la incubación en presencia de cloranfenicol durante  24 o 48 h. Los parámetros de activación celular se determinaron mediante la marcación de  moléculas de superficie MHCII, CD80 y CD86 junto con  la enzima intracelular inducible sintetasa de óxido nítrico (iNos) cuantificándolos por citometría de flujo. La presencia del lactobacilo aumentó significativamente la internalización de C. rodentium en la multiplicidad de infección de 100:1. La coincubación del enteropatógeno con el lactobacilo aumentó 2,5 veces la expresión del marcador de superficie MHCII y la molécula coestimuladora CD86 respecto a la infección por C. rodentium luego de 24 h. El porcentaje de células positivas para iNos a las 48 h se incrementó en un 17,3 % en la coincubación (p < 0,05 t test) respecto a C. rodentium. La producción de NO2 también aumentó significativamente en las condiciones mencionadas. Los resultados demuestran que la cepa CIDCA 133 es capaz de incrementar la internalización y la activación de macrófagos infectados por C. rodentium.