Validación de un método para el análisis de citrulina y aminoácidos relacionados en plasma empleando una columna monolítica comercial en RP-HPLC

ACQUAVIVA, A.; CASTELLS, C. B.; ROMERO, L. M.; HERRERO MARTINEZ, J. M.

Mendoza

Congreso; 7° Congreso Argentino de Química Analítica; 2013

El objetivo de este estudio fue analizar algunos aminoácidos libres en el plasma (como, glutamina, L-arginina, citrulina, ácido glutámico, prolina y ornitina) que desempeñan un papel importante en la división celular, cicatrización de heridas, eliminación de amoníaco, la función inmunológica, y la liberación de hormonas en los mamíferos. Estudios recientes han revelado que los perfiles anormales de citrulina y arginina se pueden utilizar como diagnóstico clínico para diferentes trastornos tales como el cáncer digestivo, síndrome del intestino corto y la capacidad de absorción del intestino delgado. Con el fin de entender estas enfermedades, la ruta metabólica de la glutamina extraída por el intestino humano constituye un factor clave. Por lo tanto, es muy importante para los propósitos clínicos el desarrollo de métodos analíticos sencillos y precisos para la determinación simultánea de este aminoácido y sus metabolitos relacionados (es decir, citrulina, L-arginina, etc) en el plasma u otros fluidos biológicos. En este trabajo se describe y realiza la validación de una determinación por HPLC de importantes aminoácidos que intervienen en enfermedades del intestino delgado utilizando una columna monolítica de sílice C18: Chromolith Performance RP18 100x4.6mm, acoplada a la detección por arreglo de diodos. Los aminoácidos fueron derivatizados con 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC)-cloruro luego de la desproteinización del plasma. La optimización de las condiciones de reacción ha sido realizada previamente. Las principales características del método son la rapidez en la reacción, su factible automatización y que los resultados para plasma humano fueron reproducibles. Se presentan las correspondientes curvas de calibración, los parámetros estadísticos relevantes y las figuras de mérito.