Modelo para la Optimización de Separaciones mediante Electroforesis Capilar. Aplicación al Análisis de Harmanos en Algas por CE-MS

MARCOS TASCÓN; FERNANDO J. BENAVENTE MORENO; LEONARDO G. GAGLIARDI

Mendoza

Congreso; VII Congreso Argentino de Química Analítica; 2013

AAQA

P { margin-bottom: 0.21cm; direction: ltr; color: rgb(0, 0, 0); }P.western { font-family: "Liberation Serif","Arial Unicode MS",serif; font-size: 12pt; }P.cjk { font-family: "WenQuanYi Micro Hei","Arial Unicode MS"; font-size: 12pt; }P.ctl { font-family: "Lohit Hindi"; font-size: 12pt; } En la optimización de la separación de mezclas complejas de analitos parcialmente ionizados por electroforesis capilar la importancia radica no solo en la separación entre los distintos compuestos a analizar sino también en la separación relativa a los compuestos neutros que migran con el flujo electroosmótico (EOF). Sin esta consideración aquellos compuestos con bajas movilidades no se separarán del grupo de compuestos neutros siempre presentes en las muestras reales. Para ello se creó un nuevo parámetro que describe de una forma más completa la selectividad que existe entre un par de analitos, y a su vez, respecto de una sustancia neutra hipotética que viajaría con el EOF. En base a este parámetro es posible crear una ecuación de optimización de la separación de todos los analitos como función del pH. Encontrando el valor máximo de dicha función puede obtenerse el pH óptimo teórico de separación. Dado que en la práctica pueden existir otras interacciones o variables no consideradas, es recomendable realizar una evaluación experimental de la separación alrededor del valor optimizado teóricamente (± 0.2 unidades de pH), junto con la naturaleza del electrolito para mejorar la eficiencias de la misma. El modelo fue puesto a prueba con una mezcla de seis alcaloides de la familia de los harmanos. Estos compuestos poseen una estructura primaria β-carbolínica y difieren entre ellos en un sustituyente o en una insaturación. Dado que poseen tamaños moleculares y propiedades fisicoquímicas muy similares entre sí, este grupo de analitos representa un desafío interesante para poner a prueba este nuevo modelo de optimización. Los harmanos están presentes en concentraciones variables en diversas especies vegetales, como el wakame (Undaria Pinnatifida), un alga invasiva de las costas de la Patagonia Argentina. Sin embargo, dado que los harmanos poseen efectos psicotrópicos y, según estudios recientes, pueden ser cancerígenos1,2, se requiere un control de sus niveles. En este trabajo se mostrará la validez del modelo para la optimización teórica de la separación de los harmanos, empleando soluciones patrón y la aplicación a muestras reales de wakame mediante electroforesis capilar acoplada a la espectrometría de masas con analizador de trampa de iones (CE-IT-MS)3. El método de CE-IT-MS optimizado permite identificar inequívocamente los diferentes harmanos confirmando su estructura mediante masas en tandem (MS-MS).