DESARROLLO DE METODOLOGÍAS DE DIAGNÓSTICO RÁPIDO PARA PATOLOGÍAS VIRALES.

VILLAGRA A.; FLORES C.Y.; PERI IBAÑEZ E.S.; ZUBIETA M.; SILVESTRE D.; MANDILE M.G.; ARGÜELLES M.H.; CASTELLO A.A.

Florencio Varela

Jornada; 12° Jornadas Científicas y de Gestión del Hospital El Cruce, Dr. Nestor C. Kirchner.; 2019

Hospital El Cruce, Dr. Nestor C. Kirchner.

Este trabajo se orienta al desarrollo de metodología de detección rápida utilizable por personal de salud sin necesidad de equipamiento ni entrenamiento especial. Si bien existen pruebas de este tipo disponibles comercialmente, la mayoría deben ser importadas, limitando su acceso, en especial para el sistema público de salud. Por esta razón, apuntamos a la utilización de insumos de bajo costo y/o fabricados en el país, para maximizar las posibilidades de transferencia al sector productivo y de salud, lo que podría constituir el primer paso de una sustitución de importaciones.Se desarrollaron dos prototipos, una inmunocromatografía de flujo lateral (ICFL) y un ensayo de inmunofiltración (EIF) para la detección de Rotavirus del grupo A (RVA) y nos hallamos en etapas más tempranas de metodologías para detección de Virus sincicial respiratorio (VSR) y Dengue-1 (DENV-1).Se utilizaron membranas de PET con poros perfectos para el EIF y membranas comerciales de nitrocelulosa para la ICFL, y anticuerpos conjugados a nanopartículas de oro de producción propia.Se optimizaron condiciones de reacción, y se testearon ambos prototipos con muestras clínicas de nuestra colección. Se validó y comparó la performance de la ICFL contra un método comercial y un ELISA de referencia. Además, se produjeron y transfirieron un número de kits al laboratorio del HEC para llevar a cabo su validación en el ámbito clínico. La ICFL mostró un 84% de sensibilidad y 100% de especificidad contra el ELISA de referencia y un desempeño idéntico al del método de ICFL comercial con el cual se comparó. Además, exhibió una buena performance en el ámbito clínico. El EIF obtuvo resultados satisfactorios en cuanto a sensibilidad y especificidad, comparables a los de la ICFL.Se seguirá trabajando en el formato del EIF para poder llevar a cabo su validación. Se evaluarán nanopartículas alternativas, y membranas modificadas con grupos reactivos, para aumentar la sensibilidad en la ICFL y el EIF, respectivamente. Además, hemos desarrollado una ICFL para detección de VSR cultivado in vitro y se trabaja en la detección en muestras clínicas; y se encuentra en sus primeras etapas el desarrollo de ICFLs para la detección de DENV-1.