NUEVAS FORMAS PARA VIEJOS CONOCIDOS: NANOLIPOSOMAS COMO VEHICULO PARA LA ADMINISTRACION DE EXTRACTOS DE Annona cherimola MILL. (ANNONACEAE)

MONTANARI, JORGE; G.H. MARIN; G.O.HAAG; ALONSO, S. DEL V.; E. MANSILLA; M.E. DEL VALLE; M.A ROSELLA

La Plata

Congreso; 2º Congreso de Preparaciones en Farmacia; 2019

Colegio de Farmaceuticos de la Pcia de Bs.As.

Introducción: A.cherimola es una especie utilizada tradicionalmente con diversos propósitos medicinales. Sus extractos han demostrado ser efectivos in vitro como agentes citotóxicos.Objetivo: Preparación de liposomas conteniendo extractos de A.cherimola y comparación de su efectividad (penetración, selectividad y potencia) con respecto a la administración del extracto solo sobre células B-CLL in vitro.Población: Células tumorales (B-CLL) aisladas de pacientes oncológicosMateriales y métodos: Extracción de hojas de A.cherimola y fraccionamiento.Células B-CLL cultivadas 24, 48 y 72 hs con concentraciones decrecientes en RPMI1640.Evaluación del grado de apoptosis y muerte celular mediante uso de colorantes vitales y citometría de flujo.Encapsulación de extractos más activos en liposomas de fosfatidilcolina de soja, (250nm, marcados con Rhodamina) por la técnica de formación de films, resuspensión, sonicación y pasaje por extrusor.Los liposomas con extracto fueron probados sobre las células B-CLL nuevamente. Las mediciones de penetración se realizaron a los 5, 30 y 60 minutos post inicio de los cultivos. La penetración celular se midió con el microscopio de fluorescencia confocal.Los niveles de apoptosis y muerte celular se evaluaron mediante las mismas técnicas.Se testearon con células de B-CLL siete extractos de A.cherimola: 1.Acuoso total y fracciones 2.cloroformo, 3. n-butanol, 4. metanol, 5. acuoso remanente, 6. acetato de etilo, 7. cloroformo.ResultadosLos extractos con mayor actividad pro-apoptotica a 24 hs de cultivo, fueron: 1: 92%; 2: 80 % y 3: 60 %.Las nanopartículas 1, 2 y 3 cargadas con los extractos en una concentración de 1/320 mostraron porcentajes de apoptosis de células tumorales similares a las obtenidas con extractos en suspensión a 24 hs de cultivo. El extracto 1 administrado en forma de nanopartícula fue el único que demostró niveles de apoptosis en células de B-CLL de hasta el 90% aún en concentraciones de 1/640. Los linfocitos normales controles mostraron el mismo porcentaje de apoptosis que cuando se usaron los extractos en suspensión.Conclusiones: El extracto acuoso de A.cherimola es potencialmente efectivo para el tratamiento de la B-CLL, con alto nivel de selectividad y seguridad biológica, ya que no afecta los linfocitos normales en forma significativa.La efectividad aumenta cuando el extracto se utiliza en forma de liposomas, abriendo la posibilidad de una nueva forma farmacéutica para su administración