IMBICE   05372
INSTITUTO MULTIDISCIPLINARIO DE BIOLOGIA CELULAR
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
CULTIVO DE ALTA DENSIDAD DE E COLI A ESCALA DE 5 LITROS PARA OBTENER UNA SIMIL-PROTEINA A RECOMBINANTE
Autor/es:
PAMELA KIKOT; HILDA CORREA; MARIANO GRASSELLI; CLAUDIA GIMENEZ
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XVI CONGRESO ARGENTINO DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA INDUSTRIAL Y V CONGRESO INTERNACIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA INDUSTRIAL; 2019
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Farmacia y Bioquímica Industrial (SAFYBI)
Resumen:
La proteína A es un proteína de aproximadamente 48 kDa con capacidad de unir inmunoglobulina G (IgG) con gran afinidad. Esta proteína ha sido ampliamente estudiada y modificada para su aplicación en procesos biotecnológicos (purificación industrial de monoclonales) y en sistemas de diagnóstico que involucren IgGs. La proteína nativa contiene cuatro sitios de unión por la IgG, sin embargo por motivos estéricos solo 1 o 2 de ellos pueden ser ocupados simultáneamente. Dado que la expresión de proteínas recombinantes en E.coli es más eficiente con proteínas de bajo PM, se desarrolló previamente una proteína conteniendo solo dos subunidades, denominada AviPure que además tiene agregada una etiqueta con la estructura His-Cys-His-Cys-His, la cual tiene una doble función: (i) permite su purificación por afinidad por iones metálicos inmovilizados (IMAC); y (ii) los grupos tioles de las Cys pueden ser utilizados para la inmovilización de la misma a matrices activadas con grupos epóxido, generando uniones tioeter químicamente muy estables.El objetivo de este trabajo fue la optimización de un proceso de fermentación de E.coli, la expresión y purificación del AviPure en la escala de 5 Litros.