AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN DE DIFERENTES TRANSCRIPTOS DE ASIP EXPRESADOS EN LA PIEL DE LA LLAMA

ANELLO MELINA1, DAVERIO, M.S.1,2, NOCELLI, C.3, RODRIGUEZ S.S.1, ARBELETCHE VIDAL RIOJA L.B.1, RENIERI C.4, DI ROCCO F.1

ORURO

Congreso; VIII WORLD CONGRESS ON SOUTH AMERICAN CAMELIDS-2015I; 2019

Universidad Tecnica de Oruro

AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN DE DIFERENTES TRANSCRIPTOS DE ASIP EXPRESADOS EN LA PIEL DE LA LLAMA Isolation and characterization of different ASIP transcripts expressed in the skin of llamaAnello Melina1, Daverio, M.S.1,2, Nocelli, C.3, Rodriguez S.S.1,Arbeletche Vidal Rioja L.B.1, Renieri C.4, Di Rocco F.1RESUMEN: La llama (Lama glama) presenta una gran variedad de fenotipos de color. Se sabe que el locus responsable de los fenotipos coloreados es el locus Agoutí. A su vez, el gen de proteína de señalización Agoutí (ASIP) se encarga de controlar la distribución de los pigmentos, usando diferentes promotores y primeros exones no codificantes alternativos. En el presente trabajo nos propusimos aislar y caracterizar los transcriptos de ASIP presentes en la piel de la llama. Para ello se tomaron biopsias de piel a partir de las cuales se extrajo el ARN total. Se utilizó PCR-RACE para amplificar los ARNm correspondientes a ASIP con sus extremos 5?UTR. Luego, estos productos fueron clonados y secuenciados. Hasta el momento se aislaron y se caracterizaron tres transcriptos distintos de ASIP en llamas. Estos presentaron una estructura semejante y distintos grados de similitud con los transcriptos de ASIP descriptos en otras especies de mamíferos. Además, se observó que los tres transcriptos tienen en común una secuencia de 10pb que precede al sitio AUG. Actualmente continuamos con este estudio ya que es posible que existan más transcriptos de ASIP aun no aislados. Luego, este trabajo se completará con un análisis de expresión y un estudio de asociación entre los niveles de expresión de los transcriptos y el fenotipo de color de las llamas. Estos resultados serán de utilidad para comprender el rol de ASIP en los mecanismos de pigmentación de la llama.ABSTRACT: The llama (Lama glama) presents a wide variety of color phenotypes. It is known that the locus responsible for colored phenotypes is the Agoutí locus. Moreover, Agoutí signaling protein gene (ASIP) controls the distribution of pigments using of different promoters and alternative non-coding first exons. The aim of this work was to isolate and characterize ASIP transcripts in the skin of llama. To do so, skin biopsies were taken and total RNA was extracted. PCR-RACE was used to amplify mRNAs corresponding to ASIP with their 5´UTR ends. Then, these products were cloned and sequenced. So far, three different ASIP transcripts were isolated and characterized. They presented similar structure and different degrees of similarity with ASIP transcripts described in other mammalian species. In addition, a common sequence of 10 bp preceding the AUG was observed in all three of them. We are currently continuing with this study since it is possible that there are more ASIP transcripts not yet isolated. Afterwards, we plan to complete the work with an expression analysis and association studies between the expression levels of the transcripts and coat color phenotypes. These results will be useful to understand the role ASIP plays in the pigmentation mechanisms of the llama.