Técnica de desnaturalización de alta resolución aplicada al estudio de marcadores moleculares asociados a susceptibilidad a la obesidad

SALA C; QUINTANA S; ALZAMENDI A; SANTOS MR; BRAVI CM; BAILLIET G

Necochea, Quequén

Congreso; XIII Jornadas Nacionales de Antropología Biológica; 2017

Asociación Antropología Biológica Argentina

La OMS define a la obesidad como una acumulación anormal o excesiva de tejido adiposo que puede ser perjudicial para la salud. Contribuyen al desarrollo de esta patología tanto factores ambientales como genéticos. Se han descripto unas 150 mutaciones puntuales vinculadas a la obesidad. Las de mayor interés son las que han sido significativamente asociadas a medidas antropométricas, en especial IMC (índice de masa corporal). Para el presente trabajo se seleccionaron cuatro marcadores: GHRL (ghrelin and obestatin prepropeptide), SOCS-3 (Suppressor of cytokine signaling 3), FTO (alpha-ketoglutarate dependent dioxygenase), GNPDA-2 (glucosamine-6-phosphate deaminase 2). El objetivo fue determinar la utilidad de la técnica de "High ResolutionMelting" (HRM) como método para identificar variantes en dichos loci. Se realizaron amplificaciones por PCR en Tiempo Real apartir de ADN correspondiente a 25 individuos no emparentados con el Intercalante Evagreen y posterior análisis por HRM .Como resultado, para cada marcador se obtuvieron tres perfiles de melting diferentes, que se corresponden con los genotipos esperados (dos homocigotas y un heterocigota). Los alelos definidos por los SNPs mutados se hallaron en una proporción del 28%, 31%, 36% y 48% para FTO, GNDPA2, GHRL y SOCS3 respectivamente. Si bien el tamaño muestral es pequeño, se encontró que tres de los marcadores (SOCS-3, FTO, GNPDA-2) se encuentran en equilibrio de Hardy-Weinberg en la población, mientras queGHRL presenta un desvío respecto a dicho equilibrio (p=0,026). En conclusión, la técnica de HRM es un método rápido y eficiente para distinguir variantes en genes asociados a la obesidad.