Producción de Proteínas Recombinantes, producción y purificación de la proteína fluorescente verde (?Green Fluorescent Protein GFP?) en E. Coli M15

SILVIA SOTO ESPINOSA; MARIANO GRASSELLI

CABA

Simposio; 4to Simposio Argentino de Procesos Biotecnologicos; 2016

UNQ-LaMaBio

Ocho alumnos participaron como coautoresLa asignatura Producción de Proteínas Recombinantes (PPREC) correspondiente a la Lic. en Biotecnología de la UNQ, orientación Bioprocesos, tiene como objetivo integrar los conocimientos y habilidades adquiridos por los estudiantes en las asignaturas Ingeniería genética, Bioprocesos y Purificación de proteínas. La asignatura está compuesta de clases teóricas, discusión de trabajos científicos y la realización de trabajos experimentales claves para la obtención de una proteína recombinantes a través de un sistema de expresión bacteriano. Los conceptos teóricos corresponden a análisis de diferentes sistemas de expresión de proteínas recombinantes.Experimentalmente se realiza un proceso completo de obtención de la proteína GFP-6xHis en una E. coli recombinante en escala 5 L. Inicialmente se estudia el crecimiento en diferentes medios de cultivo y los factores que afectan la inducción en cultivos en frascos agitados. Estos parámetros son utilizados para realizar un batch alimentado en un bioreactor. La GFP es recuperada de la biomasa por ruptura celular y posteriormente purificada por cromatografía. El estudiante culmina el aprendizaje realizando el análisis y la interpretación global de los datos obtenidos en un único informe final.Palabras clave: Green Fluorescent Protein; GFP; producción de una proteína recombinante; expresión en E. coli recombinante