IMBICE   05372
INSTITUTO MULTIDISCIPLINARIO DE BIOLOGIA CELULAR
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Complejo Teniasis/Cisticercosis: Avance en el Diagnóstico Inmunológico
Autor/es:
ASTUDILLO, OSVALDO G.; DIEGO, R. G.; CABRERA, M.; MARTINEZ, JAVIER E.; SCIUTTO, EDDA; FERREYRA, RAUL G.
Lugar:
Salvador
Reunión:
Congreso; XXIV Congreso de la Sociedad Brasileña de Parasitologia y XXIII Congreso Latinoamericano de Parasitología- FLAP; 2015
Institución organizadora:
Federación Latinoamericana de Parasitología
Resumen:
Complejo Teniasis/Cisticercosis: Avance en el diagnostic InmunológicoAstudillo Osvaldo GermánDiego Rodolfo GustavoCabrera MartaJavier MartinezSciutto EddaFerreyra RaulInstituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. ANLIS "Carlos G. Malbrán"Introducción: La cisticercosis es causada por el estadio larvario de Taenia solium en hospedadores intermediarios; el hombre puede de forma accidental adquirir la cisticercosis. La neurocisticercosis (NCC) es la enfermedad parasitaria más importante del sistema nervioso central. El diagnóstico de la cisticercosis se lleva a cabo por técnicas de imágenes y una extensa variedad de ensayos inmunológicos. Objetivo: Producir en forma recombinante una proteína quimérica de interés para desarrollo de un ensayo de inmunodiagnostico de NCC humana. Metodología: Se trabajó con muestras remitidas según los estándares para investigación en sujetos humanos captados como casos clínicos. Para producir en forma recombinante la proteína de interés, se empleó un sistema de clonado y expresión heteróloga (bacteria ó levadura). Así mismo, se utilizó la técnica de western-blot para determinar la inmuno reactividad de dichas proteínas como capturadoras de anticuerpos en este sistema. Resultados: La quimera CHIM_OPT3 fue expresada en Escherichia coli a partir del vector pET23a (Novagen). Paralelamente, la misma construcción fue producida, por secreción al medio de cultivo, en Pichia pastoris mediante inserción integrativa desde el plásmido pPIC9 (Invitrogen). Las proteínas totales de cada preparación fueron analizadas mediante SDS-PAGE/Western-blot, mostrando variada reactividad frente a sueros de pacientes con diagnóstico confirmado de neurocisticercosis. Conclusiones: El diagnóstico inmunológico se basa en la detección de anticuerpos contra el parásito. Los métodos de diagnóstico inmunológico convencional presentan graves limitaciones, baja sensibilidad y especificidad y son basados en la utilización como antígeno de material parasitario. La idea de producir en forma heteróloga una proteína de interés está sustentada en la búsqueda de herramientas eficientes a la hora del diagnóstico. Sin embargo, es necesario evaluar las proteínas producidas con un panel de sueros, para verificar su futura utilización.