Modificación de nanocanales perfectos en films de PET con proteínas funcionales

SILVIA SOTO ESPINOZA; G. ESPÓSITO; CLAUDIA ARBEITMAN; MARIANO GRASELLI

Bariloche

Congreso; XIV Encuentro de Superficies y Materiales Nanoestructurados; 2014

El desarrollo de nuevos materiales ha tenido un salto cualitativo a partir del impulso de la nanotecnología. Nuestro laboratorio se dedica a la modificación de polímeros sintéticos en escala micro y nanométrica, a través del uso de las radiaciones ionizantes, para aplicaciones biológicas. En este trabajo se presenta la funcionalización de los nanocanales formados en las membranas de poros perfectos con proteínas específicas. Las membranas fueron sintetizadas a partir de films de PET irradiados con iones pesados, sensibilizado con UV y finalmente un grabado químico con NaOH, que regula el diámetro de poro. Inmediatamente después, las membranas fueron modificadas químicamente vía radicales remanentes, lográndose así la modificación específica de las paredes internas de los nanocanales. Las proteínas Green Fluorescent Protein (GFP) y la enzima B-lactamasa fueron inmovilizadas covalentemente sobre esta modificación. Las modificaciones se caracterizaron por microscopia confocal y fluorometría, para evaluar la respuesta del material al pH del medio y la presencia de un sustrato. Las propiedades biocataliticas de la enzima inmovilizada se estudiaron aplicando el modelo de Michaelis Mentel. Las membranas modificadas con GFP modificaron su fluorescencia con los cambios de pH del entorno, mientras que la B-lactamasa inmovilizada hidrolizó el sustrato específico, aunque con una Km levemente mayor que la enzima libre.