Efecto a largo plazo de compuestos radiomiméticos sobre los telómeros en células de mamífero

PAVIOLO, N.S.; CASTROGIOVANNI, D.C.; BOLZAN, A.D.

Rosario

Congreso; XV Congreso Latinoamericano de Genética (ALAG), XLI Congreso Argentino de Genética, XLV Congreso de la Sociedad de Genética de Chile (SOCHIGEN) y II Reunión Regional SAG-LITORAL; 2012

Se estudió el daño cromosómico inducido por bleomicina (BLM) y estreptonigrina (EN) sobre los telómeros y la actividad de la enzima telomerasa en células de mamífero. El objetivo fue evaluar la persistencia en el tiempo de la inestabilidad telomérica (IT) inducida por compuestos radiomiméticos. Se aplicó la técnica de Hibridación In Situ Fluorescente (FISH) con sonda telomérica de tipo PNA, sobre extendidos cromosómicos de células de rata (línea celular ADIPO-P2 de tejido adiposo) expuestas en faz logarítmica de crecimiento a 2,5 μg/ml de BLM y 100 ng/ml de EN a 37ºC, durante 30 y 20 minutos respectivamente. Los cultivos fueron sacrificados a las 18 horas, 10 y 15 días posratamiento. La actividad de la enzima telomerasa se determinó aplicando el ensayo TRAP (Telomeric Repeat AmplificationProtocol). Ambos compuestos indujeron IT persistente (presente en todos los tiempos postratamiento) e IT retardada (de aparición tardía). La IT persistente consistió en cromosomas incompletos (CI) (BLM), señales teloméricas adicionales (EN) y pérdida o duplicación de señales teloméricas prexistentes (BLM y EN), La IT retardada consistió en fusiones teloméricas a los 10 y 15 días postratamiento (BLM) o CI a los 15 días postratamiento (EN). No se observó relación entre la IT inducida por la BLM y la actividad de la telomerasa, mientras que la disfunción telomérica presente en las células expuestas a EN estuvo acompañada por una disminución de la actividad telomerásica, lo que sugiere que esta enzima estaría involucrada en la IT inducida por este compuesto.