Caracterización de líneas celulares de leucemia mieloide crónica sensible (Ko562) y resistente (Ki562) al imatinib.

NORIEGA NF; FUNDIA AF; ANADÓN MR; STAROPOLI S; SARANGO ORTEGA YB; LOMPARDIA S

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; 48 Congreso Argentino de Genética; 2020

Sociedad Argentina de Genética

La leucemia mieloide crónica (LMC) se caracteriza por el gen de fusión BCR-ABL1 generado por la traslocación t(9;22)(q34;q11) y es eficientemente tratada con Imatinib (IM). La línea celular K562 deriva de una paciente con LMC en crisis blástica. El objetivo del trabajo es caracterizar las líneas celulares Ko562 (sensible a IM) y Ki562 (resistente a IM) para identificar la base de la resistencia. Se estableció el cariotipo por citogenética convencional y FISH con la sonda BCR-ABL1 (LIVE de LEXEL). Se cuantificó la expresión del transcripto BCR-ABL1 por qRT-PCR y se estudiaron las mutaciones en el dominio kinasa por PCR y secuenciación. Por Western Blot se estudió la expresión de la proteína BCR-ABL1 (p210) y por citometría de flujo se midió la funcionalidad de la glicoproteína Pgp ligada a la multiresistencia a drogas. El número modal de las 2 líneas fue de 69 cromosomas. El cariotipo de Ko562: 56~69, XX, +1, +2, +3, +5, +del(5)(q?), +add(6)(p?), +del(7)(q?), +del(9)(p?), +10, +12, +16, +18, +19, +add(20)(p?), der(1,21)(q?q?), +dup(22)(q?) [cp10]. No se pudo establecer el cariotipo de Ki562 por falta de metafases. Mediante FISH se confirmó la amplificación del gen BCR-ABL1 en ambas líneas. A su vez, estas presentaron mayor expresión del transcripto BCR-ABL1 respecto del control de reacción y la mutación F359I en diferente proporción. No hubo diferencias en la actividad de Pgp, pero Ki562 mostró mayores niveles de expresión proteica de p210 (p