MALDI-TOF-MS COMO HERRAMIENTA DIAGNÓSTICA EN SEPSIS

TODERO MARÍA FLORENCIA; BEATRIZ LÓPEZ; MARTÍN A. ISTURIZ; JOHANA MONTESERIN; NORBERTO SÍMBOLI; NOEMÍ YOKOBORI; LEDESMA, MARTÍN; ROXANA PAUL; CARLOS VAY; BÁRBARA REARTE

CABA

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología (CAM) 2019; 2019

La sepsis continúa siendo una de las principales causas de muerte en unidades de terapia intensiva a nivel mundial. Este síndrome presenta una naturaleza bifásica con una fase proinflamatoria inicial seguida de una respuesta antiinflamatoria tardía, lo que condicionaría la terapéutica. Sin embargo, en la actualidad no existe un abordaje diagnóstico preciso de estas dos fases, por lo que en general se desconoce en qué estadio se encuentra el paciente. El objetivo de este trabajo fue evaluar la utilidad de los perfiles proteicos del plasma utilizando la técnica MADI-TOF MS, para la determinación de estados pro o antiinflamatorios en la sepsis. Se utilizaron modelos murinos desafiados con lipopolisacáridos emulando las diferentes fases de la sepsis (fase proinflamatoria (PRT, n=29) y antiinflamatoria (ANT, n=23)) frente a controles no tratados (Ctrl, n=25). Se determinaron en plasma citoquinas, variables hematológicas e inmunológicas. A su vez, se realizó la adquisición de dos espectros por cada plasma por la técnica de MALDI-TOF-MS en el rango 2-20 kDa (152 de espectros). Los espectros se procesaron con el software RStudio, se realizaron análisis no supervisados (Hierarchical K-means clustering) con los datos procesados luego de una categorización binaria y se entrenaron algoritmos de machine learning (división aleatoria del conjunto de datos, entrenamiento en uno de los grupos y predicción en el otro) para predecir los grupos PRT/ANT/Ctrl (exactitud (Ex), sensibilidad (S), especificidad (E)) a partir de las señales diferenciales (picos). Estos picos fueron asignados informáticamente por bases de datos: Expasy/TagIdent, uniprot, KEEG y STRING. La fase PRT se caracterizó por un bajo recuento de leucocitos y un aumento de citoquinas proinflamatorias como el TNF-α, mientras que en la fase ANT se observó una leucocitosis, aumento de corticosterona y bajo título de anticuerpos: [leucocitos (106/ml): Ctrl=6.6 ± 0.5; PRT= 1.9 ± 0.2*; ANT=11.2 ± 0.7 &; * & p