LAS VÍAS NHEJ Y HR LIMITAN LA FORMACIÓN DE REARREGLOS CROMOSÓMICOS INDUCIDOS POR ETOPÓSIDO EN CÉLULAS HUMANAS

PALMITELLI M; DE CAMPOS NEBEL M; KRAMAR J; GONZÁLEZ CID M

Mendoza

Congreso; XVII Congreso de la Asociación Latinoamericana de Genética (ALAG); 2019

Sociedad Argentina de Genética

Etopósido (ETO), droga antitumoral, produce rupturas de doble cadena (RDC) y está relacionado al desarrollo de neoplasias secundarias. Deficiencias en las vías de reparación de las RDC dependiente de DNA-PKcs (NHEJ) y de Rad21 (HR) generan rearreglos cromosómicos, inestabilidad genómica y tumorigénesis. Se evaluó el rol de DNA-PKcs y Rad21 en la cinética de formación de rearreglos cromosómicos inducidos por ETO en células humanas. Dosis crecientes de ETO (0,005-1µg/ml) disminuyeron la sobrevida de las células silenciadas HeLa Rad21kd en relación a su control (NS, p20 focos γH2AX (marcador de RDC). La reparación incorrecta de estas RDC generó figuras de intercambio cromatídico a las 5-6hs y cromosomas dicéntricos a las 28hs postratamiento. Los datos obtenidos revelaron que la deficiencia de DNA-PKcs y de Rad21 induce un aumento sinérgico de ambos tipos de rearreglos cromosómicos frente a ETO en comparación a las deficiencias individuales. Así, el valor de dicéntricos/célula fue 0,6±0,1 en células NS tratadas con NU7026-ETO, de 0,6±0,1 en células Rad21kd tratadas con ETO y de 1,5±0,2 en células Rad21kd tratadas con la combinación NU7026-ETO. Estos resultados indican que ante actividades disfuncionales de NHEJ y de HR, la vía alterna de reparación (alt-EJ) genera rearreglos cromosómicos persistentes, sugiriendo un rol causal asociado a los efectos adversos del tratamiento con ETO.