Determinación de la actividad de factores PDGF (Platelet-derived Growth Factor) en fibroblastos 3T3 para el desarrollo de nano-vehículos de interés biomédico.

DI SANTO, M.C.; PEREZ, O.E.; POZNER, ROBERTO G.; ALAIMO, A.

Quilmes

Jornada; 3ra Reunión de Jóvenes Investigadores de Ciencia y Tecnología. Universidad Nacional de Quilmes.; 2018

UnQui

Los α-gránulos contenidos en las plaquetas contienen una variedad de proteínas pro y antiangiogénicas, mitogénicas y quimiotácticas. Los factores de crecimiento (FC) almacenados en los α-gránulos incluyen el FC de endotelio vascular (VEGF), el FC derivado de plaquetas (PDGF), el FC de fibroblastos (FGF), el FC epidérmico (EGF), el FC de hepatocitos (HGF) y el FC similar a Insulina (IGF). Estos activadores angiogénicos colectivamente promueven la permeabilidad de la pared de los vasos y el reclutamiento, el crecimiento y proliferación de células endoteliales y fibroblastos. Aunque estos factores son secretados por una variedad de células inflamatorias, la rapidez con que las plaquetas se acumulan en lo sitios de injuria vascular las vuelve muy relevantes como fuente de mediadores mitogénicos. PDGF (Platelet-Derived Growth Factor) actúa en los procesos mencionados y resulta un factor clave en procesos de cicatrización. PDGF se presenta como homo o heterodímero según las cadenas polipeptídicas que los conforman (AA, BB, AB etc..) y tienen receptores específicos en distintos tipos celulares. Debido a su potencial mitogénico, se asume que el desarrollo de estrategias de encapsulación permitiría dosificar y localizar la acción de PDGF en los tejidos diana disminuyendo su biodisponibilidad en el resto del organismo. En tal sentido, una estrategia posible es el encapsulamiento en polímeros de Quitosano Argentino mediante uso de nanotecnología, ya que se trata de un material muco-adhesivo, biodegradable biocompatible, no tóxico y con actividad antimicrobiana que viene siendo evaluado en los últimos años de forma extensiva para su uso en aplicaciones biomédicas.Por esto nos propusimos:Evaluar la viabilidad y proliferación de fibroblastos 3T3 al aplicar distintas concentraciones de factores de crecimiento humano PDGF-aa y PDGF-bb recombinantes.Evaluar la capacidad angiogénica de factores de crecimiento (FC) humano PDGF-aa y PDGF-bb recombinantes en células endoteliales.Evaluar si existe inducción de la migración celular mediada por PDGF-aa y PDGF-bb en fibroblastos 3T3.Los resultados mostraron un aumento de la capacidad proliferativa de fibroblastos 3T3 poracción de PDGF-aa y PDGF-bb, luego de ser incubados durante 48 hs o 72 hs en un rango de concentraciones variables (25-200 ng/ml) y a bajas concentraciones de Suero Fetal bovino. Se observó un aumento en la inducción de la migración celular para ambos factores siendo mayor para PDGF-bb, luego de 7 hs posttratamiento a una concentración de 30 ng/ml. La formación de túbulos de células primarias endoteliales sobre Matrigel resultó positiva luego de 14 hs de incubación con PDGF-bb pero no con PDGF-aa. Los resultados demuestran actividad de PDGF-aa y PDGF-bb en células humanas mediante los métodos empleados, lo que permitirá su posterior análisis al incorporarlos en nanovehículos de Quitosano Argentino.