Receptores estereotipados en pacientes con leucemia linfocítica crónica. Frecuencia y distribución en diferentes países de Latinoamérica

MARÍA ELENA MÁRQUEZ; JOSÉ LUIS LÓPEZ; IRMA SLAVUTSKY; NATALIA SOTELO; PIERRE-ANTOINE DEGLESNE; RAÚL GABÚS; CARMEN STANGANELLI; JUANA CABRERA; RAIMUNDO BEZARES

Mar del Plata

Congreso; XXIII Congreso Argentino de Hematología; 2017

Sociedad Argentina de Hematología

Objetivo: El estado mutacional de IGHV (immunoglobulin heavy variable region) constituye uno de los más importantes factores pronóstico en LLC, permitiendo dividir a los pacientes en mutados (M) asociados a buena evolución clínica y no mutados (NM) relacionados a pronóstico adverso. Diferentes estudios han demostrado la presencia de un repertorio sesgado de genes IGHV en LLC, así como la existencia de pacientes que presentan BCRs (B-cell receptors) de alta homología, denominados estereotipados (BCREs). Los mismos se encuentran agrupados en clústeres (Cl) definidos en base a la similitud de la secuencia de aminoácidos (aa) de la región VH CDR3 (variable heavy chain complementary-determining region 3), entre los cuales los Cls#1, #2, #4 y #8 se hallan relacionados con el curso clínico de la enfermedad. El objetivo de este estudio fue analizar el estado mutacional, los rearreglos de IGHV y la expresión de BCREs en pacientes de diferentes países Latinaomericanos.Materiales y Métodos: Se analizaron 422 casos con LLC (253 varones; edad media: 68,4 años, rango: 35-88 años; estadios Rai: 0: 44,4%, I-II: 41% y III-IV: 14,6%), de Argentina (244), Uruguay (99) y Venezuela (79). Se trabajó con cDNA obtenido de células mononucleares de sangre periférica, empleando primers sentido específicos para las familias VH1-VH7 y consenso antisentido JH o Cµ, y secuenciación, empleando las bases de datos IMGT/V-QUEST e IgBlast para su análisis. Se consideraron como NM las secuencias con una homología ≥ 98% respecto de la línea germinal. Para el análisis de BCREs la secuencia de aa de la región VH HCDR3 fue alineada con secuencias previamente publicadas. Se empleó la herramienta bioinformática ARResT/AssignSubsets para definir Cl mayores. El estudio fue aprobado por los Comités de Ética de cada Institución. Todos los individuos proporcionaron su consentimiento informado.Resultados: Las tres cohortes presentaron una mayor proporción de pacientes con IGHV-M (53%-64%). Los pacientes argentinos mostraron una distribución VH3 > VH4 > VH1 en tanto que las cohortes restantes fueron VH3 > VH1 > VH4. El gen IGHV3-23 fue el más frecuente en Argentina y Uruguay, IGHV1-69 en Venezuela, e IGHV3-7 en Uruguay y Venezuela, observándose diferencias poblacionales para IGHV3-23 e IGHV3-7 (p ≤ 0,022). Usando alineamiento de secuencias se observó la presencia de BCREs en ~12% de los pacientes en las tres cohortes, asociados a IGHV-NM (71%). Dos casos argentinos presentaron 100% de homología en el VH CDR3, con secuencias no descriptas, pudiendo constituir un nuevo clúster. Cuando se analizaron los Cl mayores, los pacientes argentinos y uruguayos mostraron frecuencias de 12% y 11%, respectivamente, siendo ésta del 5% para los casos venezolanos. El Cl#2, asociado a mal pronóstico, fue el más frecuente en los pacientes argentinos, y el Cl#4 de curso indolente, en las otras dos cohortes. El Cl#1, de pronóstico adverso, se encontró presente en el 1,7% del total de los pacientes. En la cohorte uruguaya se observó un caso correspondiente al Cl#99, satélite del Cl#1, también de pronóstico adverso. Resulta de interés remarcar las diferencias observadas en la frecuencia del rearreglo IGHV3-21, observado en el 10% de los pacientes venezolanos (siempre asociado a receptor heterogéneo), y en menores porcentajes en la población uruguaya (2%) (p < 0,024) y argentina (6,5%), en la que el 44% de los casos correspondió al Cl#2. La cohorte uruguaya presentó el mayor número de pacientes con el gen IGHV4-34 incluidos en el Cl#4 (57%). Conclusiones: Estos resultados muestran diferencias y similitudes en los pacientes con LLC de los tres países analizados, posiblemente relacionadas a factores genéticos y/o ambientales, siendo de interés resaltar la baja frecuencia de Cls mayores en la población venezolana. Simultáneamente, cabe destacar la importancia del análisis de los BCREs, tendiente a precisar con más certeza el pronóstico de la enfermedad en estadios tempranos de la misma.