Evaluación del significado pronóstico del tamaño del clon con deleción 13q14 en pacientes con leucemia linfocítica crónica

VIRGINIA PALAU NAGORE; FLAVIA STELLA; ANDREA RODRÍGUEZ; IRMA SLAVUTSKY; BELÉN BRIZUELA; CARMEN STANGANELLI; CAROLINA PAVLOVSKY; ISABEL GIERE; RAIMUNDO BEZARES; MIGUEL PAVLOVSKY

Mar del Plata

Congreso; XXIII Congreso Argentino de Hematología; 2017

Sociedad Argentina de Hematología

Objetivo: El análisis de los rearreglos genómicos mediante FISH (Fluorescence in situ hybridization) constituye uno de los más importantes factores pronóstico en leucemia linfocítica crónica (LLC). Entre ellos, la deleción de parte del brazo largo del cromosoma 13: del13q14, es la anomalía más frecuente, encontrándose asociada a pronóstico favorable cuando se presenta como única alteración. No obstante, sabemos que existen variaciones en el tamaño del clon con del13q14 y que esta alteración puede presentarse en forma mono o bialélica. El análisis de la literatura muestra importantes diferencias en el significado clínico del porcentaje de células con esta alteración (60-85%). El objetivo del presente trabajo fue analizar el tamaño del clon con del13q14 como única alteración y evaluar su relación con la evolución clínica de los pacientes.Materiales y métodos: Se analizó un total de 65 casos con del13q14 (40 varones; edad media: 62 años; rango: 38-83 años; estadios clínicos: 0: 41,7%; I-II: 50%; III-IV: 8,3%). Se efectuó cultivo de linfocitos de sangre periférica (SP) estimulado para el análisis citogenético y por FISH empleando el panel de sondas para LLC (Live-Lexel, Buenos Aires, Argentina). Se efectuó el análisis de IGHV (immunoglobulin heavy chain variable region) a partir de cDNA obtenido de células mononucleares de SP, empleando primers sentido específicos para las familias VH1-VH7 y consenso antisentido JH o Cµ. Se efectuó secuenciación de los productos de PCR, utilizando las bases de datos IMGT/V-QUEST e IgBlast para su evaluación. Se consideraron como mutadas (M) las secuencias con una homología < 98% respecto de la línea germinal. Para el análisis de las características clínicas de los pacientes se utilizó el test `t´ de Student (para las variables cuantitativas) y la prueba de 2 o el test exacto de Fisher (para las variables categóricas). Las curvas de sobrevida fueron efectuadas con el método de Kaplan-Meier y comparadas con el test de Log-rank. Para todas las evaluaciones se consideró un p < 0,05 como estadísticamente significativo. El estudio fue aprobado por los Comités de Ética de cada Institución. Todos los individuos proporcionaron su consentimiento informado.Resultados: Se efectuó el análisis citomolecular con el panel de sondas para LLC en 263 pacientes detectándose del13q14 como única anomalía en 65 (24,7%): 71,7% monoalélica y 28,3% bialélica. En 22 casos se evaluó IGHV siendo M el 79,2% de los mismos. Seis pacientes presentaron alteraciones en el cariotipo: del13q (2), del6q (2) y cariotipo complejo (2). La distribución de casos acorde al tamaño del clon con del13q14 fue: 10-25% (11), 26-40% (6), 41-55% (10), 56-70% (11), 71-85% (15) y >85% (12). Dado el bajo número de algunos grupos, los mismos fueron reagrupados en tres categorías: 10-40%, 41-70% y 71-100%. La SV libre de eventos (SLE) para cada uno de ellos fue de: 101, 91,4 y 54,5 meses, respectivamente. Dada la similitud observada en los dos primeros se los consideró como un único grupo (10-70%). Al efectuar el análisis tomando como punto de corte el 70% de células patológicas, se encontró una SLE significativamente más corta para los pacientes con clones superiores a este valor (p < 0,05). Cabe destacar que los casos con IGHV3-21 e IGHV1-69 presentaron corta SLE (media: 8 meses). El análisis de las características clínicas no mostró diferencias entre los grupos.Conclusiones: A nuestro conocimiento, el presente constituye el primer análisis del significado clínico del tamaño del clon con del13q14 de nuestro país. Nuestros datos indican una SLE significativamente más corta en los pacientes con clones con más del 70% de las células con esta alteración, aportando un valor de referencia para el seguimiento de los pacientes con LLC.